[发明专利]载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料及其制备方法

权利要求书

1.一种载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：利用细菌纤维素天然的纳米三维网络结构，在其骨架中引入聚N-异丙基丙烯酰胺网络，制备出机械性能更优的互穿双网络水凝胶，并以此为载体负载生物抗菌剂，从而获得具有高效保湿抗菌功能的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料，具体包括以下步骤：

（1）制备细菌纤维素水凝胶；

（2）将步骤（1）得到的细菌纤维素水凝胶机械除水，使其厚度为原来的1/5，再在膜上滴加一定量生物抗菌剂水溶液，4℃冷藏放置12h，使其达到吸附平衡得到载酶细菌纤维素水凝胶；

（3）在去离子水中通氮气 3 小时以上以除去其中溶解的氧气，将N-异丙基丙烯酰胺与无机粘土溶解于除氧去离子水，在冰水浴中搅拌至溶液澄清；

（4）将步骤（2）中得到的载酶细菌纤维素水凝胶渍于步骤（3）得到的澄清溶液中，并于4℃冰箱中放置24h，使其达到吸附平衡；

（5）将步骤（4）得到的水凝胶取出并用蒸馏水反复冲洗，以去除表面吸附的物质，再将水凝胶放入40℃的恒温水浴中反应6h，进行原位自由基聚合反应，聚合完成后，得到载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料；

所述步骤（2）中的生物抗菌剂为溶菌酶或溶葡萄球菌酶中的一种或二者组成的复合酶溶液，酶用量为10U/g~1000 U/g。

2.根据权利要求1所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）细菌纤维素水凝胶的制备方法如下：取活化好的木醋杆菌1.1812菌株接入种子培养基，再取出一定量培养好的种子接入灭菌后发酵培养基中，接种时需充分振荡，使菌株分离出来并充分分散在发酵培养基中，32℃恒温静置培养8天得到具有一定厚度的细菌纤维素水凝胶。

3.根据权利要求2所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：细菌纤维素水凝胶的制备方法如下：取活化好的木醋杆菌1.1812菌株接入种子培养基，32℃振荡培养24h，摇床转速为150rpm，再取出10mL培养好的种子接入200mL灭菌后发酵培养基中，32℃恒温静置培养8天得到具有一定厚度的细菌纤维素水凝胶，将生成的细菌纤维素水凝胶取出后，用去离子水多次冲洗，除去膜表面培养基及杂质，再将膜浸泡于1%的NaOH溶液，煮沸6h，去除膜中的菌体和残留培养基，然后用去离子水多次冲洗并平衡至中性。

4.根据权利要求2或3所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：所用的发酵培养基碳源选自葡萄糖、麦芽糖、蔗糖其中的一种或几种，碳源占培养基溶液的质量分数为2%~10%。

5.根据权利要求1所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中N-异丙基丙烯酰胺与无机粘土的投料比为6:1~6:7。

6.根据权利要求1所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：在所述载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料上表面还设有具有防水透气功能的硅胶保护膜。

7.根据权利要求6所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：所述硅胶保护膜采用厚度为0.02-0.1mm的有机硅氧烷薄膜。

8.根据权利要求6或7所述的载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料的制备方法，其特征在于：将载酶细菌纤维素基复合抗菌水凝胶敷料与硅胶保护膜之间贴合后进行包装灭菌，即得到最终产品。