[发明专利]一种用于建立慢性肾病模型的组合物及其应用

权利要求书

1.一种组合物在建立慢性肾病模型中的应用，其特征在于，所述组合物由赭曲霉毒素A与环孢霉素A组成；所述慢性肾病模型为小鼠慢性肾病模型，所述组合物为施用剂量0.25mg/kg.d^-1的赭曲霉毒素A和施用剂量20mg/kg.d^-1的环孢霉素A；在所述应用中构建所述小鼠慢性肾病模型的步骤包括：所述赭曲霉毒素A和环孢霉素A的给药方式均为腹腔注射给药，给药周期为28天，6-8周龄的SPF级雌性C57BL/6小鼠从试验开始的第一天起每间隔一天给予0.25mg/kg.d^-1的赭曲霉毒素A，共28天注射天数为14天，从试验开始的第一天起每天同时给予20mg/kg.d^-1的环孢霉素A，共28天注射天数为28天，获得所述慢性肾病模型。

2.一种组合物在建立慢性肾病模型中的应用，其特征在于，所述组合物由赭曲霉毒素A与环孢霉素A组成；所述慢性肾病模型为人肾小管上皮细胞慢性肾病模型，所述组合物为施用剂量0.5μg/mL的赭曲霉毒素A和施用剂量6μg/mL的环孢霉素A；在所述应用中构建所述人肾小管上皮细胞慢性肾病模型的步骤包括：将人肾皮质近曲小管上皮细胞传代细胞系HK-2以密度为1×10⁴个细胞/孔接种于96孔细胞板上，使用含10％血清、100U/mL青霉素和100U/mL链霉素的RPMI-1640培养基在37℃、二氧化碳浓度为5％的条件下培养所述传代细胞系HK-2 24小时后，更换含4％胎牛血清的上述培养基，再同时给予0.5μg/mL的赭曲霉毒素A和6μg/mL的环孢霉素A共同培养48h，获得所述人肾小管上皮细胞慢性肾病模型。

3.一种组合物在筛选治疗慢性肾病的药物中的应用，其特征在于，所述应用为非治疗目的，所述组合物由赭曲霉毒素A与环孢霉素A组成，所述筛选治疗慢性肾病的药物的步骤包括：

步骤（1）采用所述组合物建立慢性肾病模型，所述慢性肾病模型为人肾小管上皮细胞慢性肾病模型；

步骤（2）将候选药物施用于步骤（1）所建立的慢性肾病模型；

步骤（3）用所述慢性肾病模型的肾功能指标的损伤改善程度评价及筛选治疗慢性肾病的所述候选药物；所述人肾小管上皮细胞慢性肾病模型的构建过程包括：

将人肾皮质近曲小管上皮细胞传代细胞系HK-2以密度为1×10⁴个细胞/孔接种于96孔细胞板上，使用含10％血清、100U/mL青霉素和100U/mL链霉素的RPMI-1640培养基在37℃、二氧化碳浓度为5％的条件下培养所述传代细胞系HK-2 24小时后，更换含4％胎牛血清的上述培养基，再同时给予0.5μg/mL的赭曲霉毒素A和6μg/mL的环孢霉素A共同培养48h，获得所述人肾小管上皮细胞慢性肾病模型。