[发明专利]康宁木霉LCCC30119在生产纤维素酶和烟叶发酵中的应用

说明书

本发明提供了一种康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119在生产纤维素酶和烟叶发酵中的应用，康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119能够产生高酶活性的纤维素酶，利用康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119生产纤维素酶，为纤维素酶的生产来源提供了一个新的途径，可以实现纤维素酶的规模化生产；将具有产高酶活力的纤维素酶的康宁木霉应用到烟叶发酵中，能加速烟叶中纤维素的降解，明显缩短烟叶的发酵周期，提升烟叶的品质。

技术领域

本发明涉及康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119在生产纤维素酶烟叶发酵中的应用，属于微生物应用的技术领域。

背景技术

纤维素酶不是单一酶，而是指生物降解植物纤维素生成葡萄糖的三种起协同作用的一组酶，只有在三类酶的协同作用下，才能最终把纤维素分子分解为葡萄糖。纤维素酶在烟叶醇化过程中的主要酶类，能促使烟叶理化特性发生变化。

目前，烟叶在采摘经过打叶复烤后，并不能实现工业的可用性，还需要经过自然醇化以及人工醇化，造成时间以及资金的积压，会给烟草企业带来很大的损失，同时一些烟叶随着时间的推移，造成工业的不可用性，会带来更大的损失，而生物酶的意义就在于能够提高烟叶的可用性。

研究发现有很多微生物可以分解纤维素，目前产纤维素酶的真菌主要有木霉属和曲霉属。康宁木霉是产纤维素酶最常使用到的菌株，但未见利用已有的康宁木霉菌株用来生产高活性纤维素酶及发酵烟叶的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119在生产纤维素酶和烟叶发酵中的应用，康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119能够高产纤维素酶，十分适用于生产纤维素酶和烟叶发酵。

一方面，本发明提供了康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119在生产纤维素酶中的应用，康宁木霉LCCC30119能够产生高酶活性的纤维素酶，为纤维素酶的生产来源提供了一个新的来源。

另一方面，本发明还提供了一种利用康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119生产纤维素酶的方法，该方法包括将康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119进行发酵培养，发酵液经离心得粗酶液的步骤。

优选的，所述发酵培养为液体发酵培养或固体发酵培养。

优选的，液体发酵培养的条件为：康宁木霉(Trichoderma koningii)LCCC30119的接种量为10⁵-10⁷cfu/ml，发酵温度为30～60℃，时间为2～4d，所述发酵培养为通风培养，通风量为1：0.8～1.2V/V·min；

优选的，接种量为10⁶cfu/ml，发酵温度为50℃，时间为3d，通风量为1.0V/V·min。

优选的，所述液体发酵培养所用的液体培养基含有麸皮粉4g/L、酵母膏0.5g/L、玉米粉2g/L、硫酸铵0.1g/L、磷酸二氢钾0.2g/L，pH为5-8，液体培养基的装量为60～80％；

优选的，pH为7.6，液体培养基的装量为75％。

优选的，所述固体发酵培养采用三级发酵工艺，具体包括以下步骤：

(1)在斜面PDA培养基上培养康宁木霉LCCC30119菌种，得到菌悬浮液；

(2)将菌悬浮液接种于液体培养基上扩大培养，得到种子液；