[发明专利]一种从罗非鱼骨蛋白制备风味肽的方法

说明书

本发明公开了一种从罗非鱼骨蛋白制备风味肽的方法，包括如下步骤：以罗非鱼骨为原料，清洗、干燥、粉碎、脱脂、超声波辅助酸解、酶解、离心、上清液经过膜分离、离子交换树脂吸附、解吸、干燥获得风味肽粗品。本发明具有节能环保、生产效率高、产品品质高等优点，有效推动罗非鱼加工副产物的资源化利用，有利于提升加工企业经济效益，具有积极的经济价值。

技术领域

本发明属于农产品综合加工与天然产物提取技术领域，具体涉及一种从罗非鱼骨中制备风味肽的方法，该方法通过超声波辅助酶解、膜分离、树脂吸附等工序制备苦味肽与鲜味肽。

背景技术

罗非鱼是世界重要的养殖水产之一，我国是全球最大的罗非鱼养殖国与加工出口国，2017年产量为177万吨，其中约25％出口国外。目前，我国出口罗非鱼产品以冻鱼片为主。在加工冻鱼片过程中，会产生大量低价的副产品，如鱼骨、鱼皮、鱼鳞等。由于缺乏相关加工技术，上述加工副产物往往通过简单加工，作为动物饲料或肥料销售，产品附加值较低，影响加工企业与养殖户的增收，不利于整个行业的可持续发展。

研究发现，罗非鱼骨中含有丰富的蛋白，其蛋白含量在20％左右，具有一定的开发利用价值。然而，罗非鱼骨蛋白以胶原蛋白为主(约占总蛋白的80％)，由于胶原蛋白分子量大、且结构紧密，氨基酸组成不均衡，所以罗非鱼骨蛋白营养价值较低，不适宜直接作为食物食用。

将低价蛋白通过酶解制备功能肽是低价蛋白深加工的常用方法。研究发现：通过适当酶解原料蛋白，可以制备风味肽(苦、鲜、甜、咸)等功能肽。较传统调味料，风味肽除赋予食品风味，还可以增加消费者蛋白摄入量，同时某些风味肽还具有其他有益的生理功能(如降血压、降血糖、抗氧化)，因此，风味肽的开发与应用是调味料发展方向，具有广阔光明的市场前景。

目前，国内尚未有以罗非鱼骨为原料制备风味肽的报道，为提高罗非鱼资源的利用率，增加产品附加值，推动罗非鱼产业的健康发展，有必要建立以罗非鱼骨为原料制备风味肽的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从罗非鱼骨蛋白制备风味肽的方法，实现罗非鱼加工副产物的增值加工，该方法具有生产效率高、节能环保、条件温和、产品品质好等优点。

为了实现上述目的，本发明通过以下技术方案来实现：一种从罗非鱼骨蛋白制备风味肽的方法，包括如下步骤：

1)罗非鱼骨预处理：

将罗非鱼骨除杂清洗后，干燥、粉碎、脱脂，获得罗非鱼骨粉，备用；

其中，罗非鱼骨指除去尾鳍未发生霉变的鱼骨。清洗包括1％(w/v)NaOH清洗、自来水清洗组成。鱼骨粉碎至60-200目。脱脂采用溶剂萃取，溶剂可以是正已烷、石油醚、乙醚或它们组合。

2)风味肽制备：

将步骤1)罗非鱼骨粉按1:10-1:25(w/v)加入酸溶液中，搅拌均匀，加入到超声波提取仪中，加热到80-100℃，超声波处理0.5-2.0h，随后降低温度到30-60℃，加入胃蛋白酶水解，水解0.5-2.0h，调整pH到6.5-8.0，加入复合蛋白酶，水解0.5-2.0h，水解完毕，采用配置200-600目滤布的平板离心机以3000-5000rpm离心，收集上清液；

其中，酸可以是HCl、H₂SO₄或二者的混合物。胃蛋白酶水解的pH为1.0-2.0，胃蛋白酶的添加量为原料质量的0.1％-1.0％。酸解与酶解是均保持搅拌，在酸解过程中，搅拌速度为600-1000rpm，而在酶解过程中，搅拌速度为300-700rpm。调节pH所用的试剂为NaOH和HCl。

3)风味肽分离：