[发明专利]一种用于检测末梢血的25-羟基维生素D3试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种用于检测末梢血的25‑羟基维生素D₃试剂盒及其制备方法和应用，该试剂盒包括25羟基维生素D₃免疫层析检测卡和释放剂，所述25羟基维生素D₃免疫层析检测卡包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有25‑羟基维生素D₃完全抗原，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。本发明所提供的25‑羟基维生素D₃试剂盒灵敏度高、稳定性强、线性范围宽，具有优异的准确性和精密度。

技术领域

本发明属于体外诊断领域，涉及一种用于检测末梢血的25-羟基维生素D₃试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

维生素D为类固醇衍生物，属于脂溶性维生素，有调节钙磷代谢、影响细胞增殖分化等作用，是维持人体健康必不可少的一种类固醇激素。人体内的维生素D主要通过阳光照射后合成，只有少部分从食物中摄入，维生素D在体内出现的主要形式是25-羟基维生素D。25-羟基维生素D包括5种化合物，其中与健康密切相关的是25羟基维生素D2(胶钙化醇)和25-羟基维生素D₃(胆钙化醇)。维生素D的主要作用是调节磷、钙代谢，促进磷和钙在肠道内的吸收，以及肾小管重吸收磷钙的方式，来提高血液中的磷钙水平，钙化的方法，与降钙素、甲状腺激素以及其他的激素共同作用，使骨质变得坚硬。除了具有传统意义上的骨骼效应，还能够影响肿瘤、糖尿病、心血管疾病、自身免疫疾病等非骨骼效应。

目前，临床上25-OH-D₃的检测常用方法有化学发光、胶体金免疫层析、酶联免疫法、电化学发光，这些检测方法大部分都需要对采集的全血样本进行处理，耗时较长，操作繁琐，所采用的血液样本需求量大且均为静脉血。然而对于婴幼儿、儿童、大面积烧伤等患者而言，采足需求量的血样较为困难且不易反复抽取静脉。相比之下，末梢血的采集操作简便、快捷，采血量较少，不需要专业人员操作，对人体造成的创伤较小，并且临床上的一些检测指标与静脉血没有差异，是较好的血液样本的来源。

目前临床上，25-羟基维生素D₃的检测几乎很少采用末梢血进行检测。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供用于检测末梢血的25-羟基维生素D₃试剂盒及其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种用于检测末梢血的25-羟基维生素D₃试剂盒，包括25羟基维生素D₃免疫层析检测卡和释放剂，所述25羟基维生素D₃免疫层析检测卡包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有25-羟基维生素D₃完全抗原，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体；所述1L的释放剂包括以下含量的各组分：154mg～771mg的二硫苏糖醇、0.1g～2g的十二烷基硫酸钠、2.92g～14.61g的乙二胺四乙酸、11.76g～29.41g的柠檬酸钠、12.9g～25.81g的柠檬酸三钠、10g～50g的乙醇，余量为蒸馏水。

在本发明的一个具体方案中，其中所述试纸条还包括PVC板，所述PVC板上固定有依次连接的样品垫、标记物垫、包被垫及吸水垫，所述包被垫上依次设有检测线及质控线，所述样品垫和标记物垫连接为一体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述包被垫靠近检测线的一端连接有标记物垫，靠近质控线的一端连接有吸水垫。

在本发明的一个具体方案中，其中所述标记物垫上包被有羊抗25-羟基维生素D₃单克隆抗体标记的乳胶荧光微球和兔IgG标记的乳胶荧光微球，所述羊抗25羟基维生素D₃单克隆抗体标记的荧光乳胶微球和兔IgG标记的荧光乳胶微球的摩尔比为1:0.2～4。