[发明专利]糖基转移酶UGT76G1突变体的制备及其应用有效
| 申请号： | 201910918850.2 | 申请日： | 2019-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN112553175B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 王勇;孙雨伟;刘志凤;陈卓;李建华;刘海利;吕华军 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N15/70;C12P19/56 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200032 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 糖基转移酶 ugt76g1 突变体 制备 及其 应用 | ||
1.糖基转移酶UGT76G1突变体，其氨基酸序列基于SEQ ID NO:1，第87位突变为Phe。
2.分离的多核苷酸，其编码权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体。
3.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求3所述的载体，或基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
5.一种生产权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体的方法，其特征在于，包括步骤：
(1)培养权利要求4所述的宿主细胞，获得培养物；和
(2)从培养物中分离权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体。
6.一种提高糖基转移酶UGT76G1的催化活性的方法，包括：基于其氨基酸序列SEQ IDNO:1，第87位突变为Phe。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的提高糖基转移酶UGT76G1的催化活性为提高其催化黄酮化合物的糖基化的活性。
8.一种促进黄酮化合物的糖基化的方法，其特征在于，包括以权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体进行催化。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的糖基化包括：在黄酮化合物中转移入1～3个糖基。
10.如权利要求8～9任一所述的方法，其特征在于，所述的黄酮化合物是具有以下母核结构的化合物：
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述的黄酮化合物包括：异荭草苷，荭草苷，芹菜素或木犀草素。
12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述异荭草苷的糖基化产生异荭草苷-O-葡萄糖苷、异荭草苷-O-双葡萄糖苷、荭草苷-O-葡萄糖苷。
13.权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体的用途，用于催化黄酮化合物的糖基化。
14.如权利要求13所述的用途，其特征在于，所述黄酮化合物是具有以下母核结构的化合物：
15.如权利要求14所述的用途，其特征在于，所述黄酮化合物包括：异荭草苷，荭草苷，芹菜素或木犀草素。
16.如权利要求15所述的用途，其特征在于，所述异荭草苷的糖基化产生异荭草苷-O-葡萄糖苷和异荭草苷-O-双葡萄糖苷。
17.一种用于对底物进行糖基化的组合物，其特征在于，其中含有：
权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体；或
含有权利要求4所述的宿主细胞。
18.一种用于对底物进行糖基化的试剂盒，其特征在于，其中含有：
权利要求1所述的糖基转移酶UGT76G1突变体；或
权利要求4所述的宿主细胞；或
权利要求17所述的组合物。
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