[发明专利]快速检测阿尔茨海默病相关神经丝蛋白AD7c-NTP的免疫层析检测卡及其制备方法

说明书

本发明涉及一种快速检测阿尔茨海默病相关神经丝蛋白AD7c‑NTP的免疫层析检测卡，包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株鼠抗人AD7c‑NTP单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。本发明所提供的快速检测AD7c‑NTP的免疫层析检测卡，其可用于尿液的检测，用于阿尔兹海默病的诊断。

技术领域

本发明属于体外诊断领域，具体涉及一种快速检测阿尔茨海默病相关神经丝蛋白AD7c-NTP的免疫层析检测卡及其制备方法。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)，又称老年性痴呆，是一种常见的中枢神经系统退行性疾病，具体表现为记忆力减退，认知能力下降以及运动障碍等，并伴随一系列精神症状，最终导致患者生活自理能力完全丧失。随着社会人口老龄化的进展，AD已严重威胁人类健康，庞大的患者群体给家庭和社会带来了沉重的精神和经济负担，但该病的发病机制目前尚未明确。尸检研究证实β淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)沉积形成的老年斑(senile plaque,SP)和神经元纤维缠结(nerve fiber tangles,NFT)是AD的两大病理特征，并且已经被列入AD的诊断标准。

目前AD的诊断主要依据患者临床表现、头颅CT或MRI等影像学资料、神经心理检查量表等综合评价，临床诊断率低。因此寻找高敏感度、特异度、无创的生物学指标以提高AD早期诊断率，为早期生活方式干预、药物干预及延缓病程提供帮助。

阿尔茨海默病相关神经丝蛋白(AD7c-NTP)是一种在神经元中表达的分子量约41kDa的跨膜磷蛋白。1996年麻省总医院的de la Monte教授首次发现AD7c-NTP在AD患者脑内表达水平升高，且出现在组织学尚完整的变性神经元中，证明异常AD7c-NTP表达增加是AD神经变性的早期事件。随后来自不同国家人群的大量研究证实AD7c-NTP存在于NFTs中，主要与诱发神经炎症及神经细胞死亡有关，是一种既能反应AD病理特点又具有较高灵敏性和特异性的AD生物标志物。基于尿液中AD7c-NTP与脑组织和脑脊液中的该蛋白具有相同的分子质量，并且检测结果具有相似性，尿AD7c-NTP可特异性反映大脑神经损伤，与AD7c蛋白具有同等效力。AD7c-NTP特异性分布大脑额叶、颞叶，只反映大脑神经元损伤；AD7c-NTP为神经元轴突跨膜蛋白，与AD7c蛋白共同定位；尿AD7c-NTP蛋白特异性反映脑神经元损伤，所以临床开展尿AD7c-NTP检测可以协助AD患者的早期发现及诊治。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种快速检测阿尔茨海默病相关神经丝蛋白AD7c-NTP的免疫层析检测卡及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种快速检测阿尔茨海默病相关神经丝蛋白AD7c-NTP的免疫层析检测卡，包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株鼠抗人AD7c-NTP单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述试纸条还包括PVC板，所述PVC板上固定有依次连接的样品垫、标记物垫、包被垫及吸水垫，所述包被垫上依次设有检测线及质控线，所述样品垫和标记物垫连接为一体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述包被垫靠近检测线的一端连接有标记物垫，靠近质控线的一端连接有吸水垫。

在本发明的一个具体方案中，其中所述标记物垫上包被有另一株鼠抗人AD7c-NTP单克隆抗体标记的表面活化的荧光乳胶微球和兔IgG标记的表面活化的荧光乳胶微球，所述另一株鼠抗人AD7c-NTP单克隆抗体标记的表面活化的荧光乳胶微球和兔IgG标记的表面活化的荧光乳胶微球的摩尔比为1:0.2～4。

在本发明的一个具体方案中，其中所述表面活化的荧光乳胶微球通过以下步骤制得：