[发明专利]一种高产量甲型H3N2流感病毒抗体的制备方法

说明书

本发明提供了一种高产量甲型H3N2流感病毒抗体的制备方法。包括以下工艺方法：在蛋鸡20周龄及以后，在每日普通饲料中添加3‑7%海藻粉和4‑7%蝗虫粉；制备甲型H3N2流感病毒免疫抗原、免疫产蛋母鸡，获得免疫鸡蛋、从免疫鸡蛋蛋黄液水稀释法提取甲型H3N2流感病毒抗体粗品；并对粗品进行纯化、冷冻喷雾干燥处理后，制得甲型H3N2流感病毒抗体，并进行纯度、活性检测。该工艺方法通过在鸡饲料中增加蝗虫粉和海藻粉，提高了甲型H3N2流感病毒抗体产量，并且使用蝗虫粉具有环境保护和良好的经济效益，本方法成本低、产量高、具有高特异性，可实现产业化。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，特别涉及一种高产量甲型H3N2流感病毒抗体的制备方法。

背景技术

甲型流感病毒根据其表面的血凝素（HA）抗原的不同可以分为16个亚型（H1-H16），根据神经氨酸酶（NA）抗原的不同可以分为9个亚型（N1-N9）。流感病毒通过表面蛋白抗原性的累积改变(抗原漂移)或不同流感病毒发生基因重排而产生一种新的流感病毒(抗原转变)来逃避感染宿主的免疫识别，从而在感染群体中传播、繁衍。甲型H3N2流感是一种因甲型H3N2 流感病毒引起的呼吸系统疾病。1968年香港爆发的H3N2流感至使百万人失去生命。2013年初，美国东部多个州爆发H3N2季节性流感，波士顿市政府于1月9日宣布公共卫生紧急状态。目前针对人间甲型H3N2流感大流行的防控措施主要采用化学药物和疫苗，但是化学药物的过量使用多产生的副作用及疫苗开发往往滞后于疫情暴发和疫苗只能对易感人群起预防作用的弊端显著。

鸡卵黄抗体，是母鸡在卵的发育过程中血清中的IgY有效地转移到卵黄中而得。卵黄抗体具有安全方便、简单易得、产量高、不与IgG发生交叉血清学反应；不与类风湿因子或Fc受体相结合，在免疫检测过程中可避免产生假阴性或假阳性结果的优点，且耐热、耐酸，巴氏灭菌温度下不会失活且在pH值小于3时也能保持稳定活性，这些独特的优点使鸡卵黄抗体在临床和基础科学的应用中起着重要的作用，因此卵黄抗体在医学预防领域的应用越来越受到人类的关注，甲型H3N2流感病毒抗体的研制也将带来甲型H3N2流感预防的新突破。

鸡蛋白质的摄入包括动物性蛋白和植物性蛋白，如各种昆虫和植物叶、茎、根块、籽实，这种主动寻觅竞争性的摄入，保持了构成蛋白质多种氨基酸的平衡，为免疫球蛋白的形成提供了保障，这也是野生或放养的鸡比笼养鸡免疫力强的原因之一。蝗虫是农作物的主要害虫，蝗虫粉含蛋白质74.88%，磷0.809%，是优质动物蛋白原料，添加蝗虫粉补充鸡饲料的动物蛋白，使鸡饲料的动物蛋白和植物蛋白配比合理，使鸡摄入平衡的氨基酸，可提高免疫球蛋白的产量。同时其具有环境保护和经济效益。

海藻富含海藻多糖、甘露醇、维生素和多种钾、铁、钙、磷、碘、硒、钴等常量和微量元素。在蛋鸡饲料中添加3%-7%的海藻粉，可使产蛋率提高10%以上，鸡蛋中碘含量可提高15%以上。胥保华在肉仔鸡日粮中添加纳米硒，显著提高了血清IgG水平，IgG水平最高可达到26mg/kg。郭晓尉等报道，高碘使肉鸡的免疫反应明显增强，变现在小肠上皮间上皮样淋巴细胞增多，小肠固有层、皮肤阻止中、甲状腺组织中、卵巢组织中和胰腺组织中淋巴细胞数量明显增加。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高产量甲型H3N2流感病毒抗体的制备方法