[发明专利]一种基于催化发夹自组装的二硫化钼纳米探针用于检测H5N1的方法

权利要求书

1.一种基于二硫化钼(MoS₂)和催化发夹自组装(CHA)信号放大的免标记低背景DNA荧光探针，其特征在于：

(1)DNA探针由两个互补的发夹探针组成，分别为MB1和MB2；

(2)在没有H5N1 DNA的情况下，MB1和MB2被MoS₂吸附，嵌入到分子信标(MB)中的TO，产生的荧光被MoS₂猝灭，导致较低的背景信号；

(3)在有H5N1存在的情况下，CHA反应将被触发产生大量的dsDNA。当MoS₂添加到上述混合物后，dsDNA不能被MoS₂吸附，TO嵌入到dsDNA产生强荧光。

2.根据权利要求1所述的一种基于MoS2和CHA信号放大的免标记低背景DNA荧光探针，其特征在于，MB1和MB2的序列号为：

MB1：

5'-AGACTCTTGAGTTCTCAGTATGAAGAGGTGTAGACATACTGAGAACTC-3'

MB2：

5'-CAGTATGTCTACACCTCTTCATACTGAGAACTCAAGAGGTGTAGA-3'。

3.根据权利要求1所述的一种基于MoS₂和CHA信号放大的免标记低背景DNA荧光探针，其特征在于，噻唑橙(TO)是一种特殊的不对称菁染料，在水溶液中基本没有荧光发射，但在与双链DNA相互作用时，无论碱基组成如何，都显示出强荧光。

4.根据权利要求1所述的一种基于MoS₂和CHA信号放大的免标记低背景DNA荧光探针，其特征在于，二硫化钼(MoS₂)，对ssDNA和dsDNA有着不同的吸附能力和显著的荧光猝灭能力。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，该DNA荧光探针可用于对H5N1 DNA进行高灵敏度、高选择性的检测。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，H5N1 DNA的检测限均为7.5 pM，具有高灵敏度。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在最佳的实验环境中，在有H5N1存在的情况下，可观察到显著变化的荧光信号。而其他四种不同类型错配的DNA造成的荧光响应明显很低，显示出对H5N1 DNA的高度选择性。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，最佳的实验条件为：MoS₂的浓度为1μg/mL，探针比例为1：1，TO的浓度为1μM，反应温度为37℃，反应时间为60分钟。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其可用于实际样品中H5N1 DNA的检测并表现出极好的回收结果。