[发明专利]一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法

权利要求书

1.一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，具体过程为：

步骤一、设计细胞生长的微图案阵列，通过干法刻蚀加工得到硅板(1-2)；

步骤二、将聚二甲基硅氧烷PDMS混合液(1-1)倒在硅板(1-2)上，对硅板(1-2)加热后切割得到固体PDMS图章(1-3)，对固体PDMS图章(1-3)的微图案表面进行硅烷化处理；

步骤三、将纤连蛋白溶液滴加到固体PDMS图章(1-3)的微图案表面并晾干；

步骤四、用泊洛沙姆溶液对玻璃基底(1-5)进行疏水化处理；

步骤五、然后将固体PDMS图章(1-3)的微图案表面贴于玻璃基底(1-5)表面，使纤连蛋白(1-4)转移至玻璃基底(1-5)上；

步骤六、进行细胞种植，种植后的细胞只能在预设形状的纤连蛋白(1-4)区域生长，从而精准控制细胞的生长边界。

2.根据权利要求1所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤一中，微图案阵列中的微图案的边长不超过20μm，微图案间距不低于100μm，干法刻蚀的深度为10μm。

3.根据权利要求1或2所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤二中，聚二甲基硅氧烷PDMS混合液(1-1)是由聚二甲基硅氧烷PDMS的预聚体和固化剂按照10:1的质量比混合制得的；加热温度为70-80℃，加热时间为60-90min。

4.根据权利要求1或2所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤二中，硅烷化处理的过程具体为：将3-氨丙基三乙氧基硅烷与丙酮溶液按1:15-1:20的比例混合，配制硅烷化溶液；将硅烷化溶液滴于固体PDMS图章(1-3)的微图案阵列表面20-30min，依次用丙酮、无水乙醇、纯水清洗，然后置于110-120℃下加热60-90min。

5.根据权利要求3所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤二中，硅烷化处理的过程具体为：将3-氨丙基三乙氧基硅烷与丙酮溶液按1:15-1:20的比例混合，配制硅烷化溶液；将硅烷化溶液滴于固体PDMS图章(1-3)的微图案阵列表面20-30min，依次用丙酮、无水乙醇、纯水清洗，然后置于110-120℃下加热60-90min。

6.根据权利要求1、2或5所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤三中，纤连蛋白溶液是纤连蛋白按2％w/v的比例溶于磷酸缓冲盐溶液中制得的。

7.根据权利要求3所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤三中，纤连蛋白溶液是纤连蛋白按2％w/v的比例溶于磷酸缓冲盐溶液中制得的。

8.根据权利要求4所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤三中，纤连蛋白溶液是纤连蛋白按2％w/v的比例溶于磷酸缓冲盐溶液中制得的。

9.根据权利要求1、2、5、7或8所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤四中，泊洛沙姆溶液是由泊洛沙姆按0.5％w/v的比例溶于磷酸缓冲盐溶液制得的。

10.根据权利要求6所述的一种利用PDMS图章精准控制单个细胞形状的方法，其特征在于，所述步骤四中，泊洛沙姆溶液是由泊洛沙姆按0.5％w/v的比例溶于磷酸缓冲盐溶液制得的。