[发明专利]一种甘露聚糖酶及半乳糖苷酶复配水解槐豆胶生产半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法在审
| 申请号： | 201910923809.4 | 申请日： | 2019-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN110669805A | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 宋亚囝;马翠萍;刘朵朵;罗学刚;李中媛;张同存 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12P19/14 | 分类号： | C12P19/14;C12P19/02;C12P19/12;C12P19/00 |
| 代理公司： | 12209 天津盛理知识产权代理有限公司 | 代理人： | 韩晓梅 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘露寡糖 半乳糖 甘露糖 半乳糖苷酶 甘露聚糖酶 底物 槐豆胶 制备 半乳甘露聚糖 调节混合物 刺槐豆胶 酶解过程 无污染物 混合物 沸水浴 复合酶 酶活力 上清液 水浴锅 单糖 放入 复配 寡糖 耗能 水解 保温 加热 无毒 协同 生产 | ||
1.一种甘露聚糖酶及半乳糖苷酶复配水解槐豆胶生产半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：步骤如下：
⑴制备质量浓度0.5％的刺槐豆胶底物；
⑵向底物中加入甘露聚糖酶和半乳糖苷酶的复合酶，该底物与复合酶的体积比为4：1，甘露聚糖酶、半乳糖苷酶的酶活力比为25:1，并调节混合物的pH为7.0；
⑶搅拌均匀后，放入44℃水浴锅中保温12±1h，将反应液沸水浴加热10min，10,000-12,000rpm离心5-10min，收集上清液，即得半乳糖、甘露糖及甘露寡糖混合物。
2.根据权利要求1所述的甘露聚糖酶及半乳糖苷酶复配水解槐豆胶生产半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：所述步骤⑴的具体步骤如下：
用20mM柠檬酸缓冲液配置质量浓度0.5％槐豆胶底物，并于115℃下进行高压蒸汽灭菌处理，待冷却后与4℃冷藏备用。
3.根据权利要求1所述的甘露聚糖酶及半乳糖苷酶复配水解槐豆胶生产半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：所述步骤⑵中半乳糖苷酶为α-半乳糖苷酶Gal27A，甘露聚糖酶为甘露聚糖酶ManA。
4.根据权利要求1至3任一项所述的甘露聚糖酶及半乳糖苷酶复配水解槐豆胶生产半乳糖、甘露糖及甘露寡糖的方法，其特征在于：所述半乳糖、甘露糖及甘露寡糖混合物还经过如下处理：
应用离子色谱技术对瓜尔豆胶水解产物进行定性和定量分析，具体条件为：
流动相组分：200mmol NaOH；色谱柱：Dionex Cabropac PA 1 150mm×3mm，6μm，Diono×PA 1Guard预柱，30mm×3mm，6μm；检测器：GoldAg-AgCl，脉冲安培检测器；流速：1mL/min；柱温：30℃；进样量：25μL。
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