[发明专利]一种聚酮化合物pyoluteorin及制备方法与用途

权利要求书

1.一种聚酮化合物pyoluteorin的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将黑曲霉发酵液过滤除去菌丝，加入乙酸乙酯进行液-液萃取，经浓缩后得到乙酸乙酯部位；萃取后的发酵液过大孔树脂，以甲醇进行洗脱，得到大极性部位；合并乙酸乙酯部位和大极性部位，分离并纯化得到目标化合物聚酮化合物pyoluteorin；

所述分离并纯化包括以下步骤：

经中低压反相柱色谱，以ODS和Sephadex LH-20作为固定相，以MeOH-H₂O 10％-100％按洗脱梯度的不同得到32个组分：E1-E16 10％-50％；E17-E28 50％-100％；E29-E32 100％；组分E21经Sephadex LH-20以MeOH-H₂O 70％等度洗脱收集得到13个组分E21-1—E21-13；其中，组分E21-13为目标化合物pyoluteorin；

聚酮化合物pyoluteorin的化学结构如式I所示：

所述聚酮化合物pyoluteorin是从湿地土壤来源的黑曲霉中分离制备得到。

2.根据权利要求1所述的聚酮化合物pyoluteorin的制备方法，其特征在于，所述黑曲霉发酵液的制备方法包括以下步骤：

将纯化的黑曲霉菌株接种于改良马丁固体培养基中，在温度为28℃的条件下培养7天，培养结束后，将含有菌株的琼脂平板切割成小块，接种于2L的锥形瓶中，每个锥形瓶均加入已灭菌的1L改良马丁液体培养基，在温度为28℃的条件下发酵28天，获得黑曲霉发酵液。

3.根据权利要求2所述的聚酮化合物pyoluteorin的制备方法，其特征在于，所述黑曲霉菌株的制备方法包括以下步骤：

将新鲜湿地土壤加入蒸馏水以1:100倍比例稀释混合均匀，取100μL土壤稀释液涂布于分离培养基上，在温度为28℃的条件下培养4天，待菌株长出后挑取纯化，获得黑曲霉菌株。

4.根据权利要求3所述的聚酮化合物pyoluteorin的制备方法，其特征在于，所述分离培养基的成分如下：改良马丁固体培养基：5.0g/L蛋白胨，1.0g/L磷酸氢二钾，0.5g/L硫酸镁，2.0g/L酵母浸出粉，20.0g/L葡萄糖，14.0g/L琼脂；在上述改良马丁固体培养基中加入50mg/L重铬酸钾和20mg/L萘啶酮酸作为抑菌剂。

5.一种权利要求1至4任一项所述的方法制备的聚酮化合物pyoluteorin在制备抗肿瘤药物中的应用，所述肿瘤为乳腺癌、三阴性乳腺癌、肺腺癌、结肠癌。

6.根据权利要求5所述的聚酮化合物pyoluteorin在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述抗肿瘤药物是以所述聚酮化合物pyoluteorin作为活性成分组成的药物或者药用组合物。