[发明专利]一种脐带间充质干细胞保存液

说明书

本发明公开了一种脐带间充质干细胞保存液，包含以下浓度的组分：低糖DMEM培养基5～10％(V/V)、人血白蛋白15～25g/L、氯化钠8～10g/L、低分子肝素钠2000‑3000AXaIU/mL、葡萄糖20～50g/L、维生素C 100～150mg/L和红景天甙10～30uM。本发明所述保存液在4℃条件下可有效保存脐带间充质干细胞，且保持稳定的细胞表型。所述保存液各组分对人体安全无毒，便于脐带间充质干细胞的后续使用，非常适用于脐带间充质干细胞的保存和运输，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于干细胞技术领域，具体涉及一种脐带间充质干细胞保存液。

背景技术

间充质干细胞(MSC，Mesenchymal Stem Cell)来源于发育早期的中胚层和外胚层，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞最初在骨髓中发现，随后还发现存在于人体发生、发育过程的许多种组织中，如骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及羊水、脐带血、胎盘等。人脐带间充质干细胞作为一种广泛应用的干细胞，其具有取材方便、易于分离、免疫原性低和具有多向分化潜能等优点，可应用于临床。

目前人脐带间充质干细胞在科研、工业和临床上的应用上还存在一些问题，如运输不便、临时保存不便等。间充质干细胞脱离培养条件后在常温下很快死亡变质，非培养状态下一般冻存于液氮罐中长期保存，小量长途运输的成本非常高，这大大限制了间充质干细胞的临床应用上的规模化生产和远距离供应。另外，在临床应用中，人脐带间充质干细胞制剂需要完成无菌、活性等质量检验后才能注射到人体，这些检验需要较长的时间才能获得可靠结果。而现在常用的低温冻存对细胞损伤较大且解冻后不能直接注射到人体，因此在干细胞制剂的质量检验期间，合适的保存液是临床应用的基础。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种脐带间充质干细胞保存液，在4℃条件下可有效保存脐带间充质干细胞，维持细胞高存活率，非常适用于脐带间充质干细胞的保存和运输。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种脐带间充质干细胞保存液，包含以下浓度的组分：低糖DMEM培养基5～10％(V/V)、人血白蛋白15～25g/L、氯化钠8～10g/L、低分子肝素钠2000-3000AXaIU/mL、葡萄糖20～50g/L、维生素C100～150mg/L和红景天甙10～30uM。

优选地，所述红景天甙浓度为15～25uM。

优选地，所述红景天甙浓度为20uM。

优选地，所述低糖DMEM培养基的葡萄糖浓度为1000mg/L。

人血白蛋白：非渗透性冷冻保护剂，主要调节细胞内水分动态平衡，维持细胞溶液渗透压。

氯化钠：有效调节溶液的渗透压，保持液体渗透压相对平衡，从而使细胞不受渗透压的影响。

低分子肝素钠：抗凝剂，具有抗凝血和抗血栓的作用，防止细胞静脉注射后产生凝集反应。

葡萄糖：细胞生长必须的碳源和能源物质，在细胞代谢过程中起着重要作用，在短暂保存中加入适量的葡萄糖可增加细胞活性；同时也是作为非渗透性冷冻保护剂，能通过主动运输进入到细胞内，最终使细胞内外保持等渗。

维生素C：帮助细胞维持各种过氧化物酶的活性，防止氧自由基对细胞膜和细胞器造成的损伤，在较长时间保存的情况下维持细胞活性。

红景天甙：多年生草本植物红景天提取物中的成分，具有抗疲劳、抗衰老、免疫调节和清除自由基等多种药理作用。

本申请发明人经过大量的研究和分析发现，保存液中含适量的红景天甙可有效提高细胞存活率，当保存液中红景天甙浓度为15～25uM，可取得更好的保存效果，尤其是当保存液中红景天甙的浓度为20uM时效果最好。