[发明专利]利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法及应用在审
申请号: | 201910928013.8 | 申请日: | 2019-09-27 |
公开(公告)号: | CN110564757A | 公开(公告)日: | 2019-12-13 |
发明(设计)人: | 吴辉;赖宁玉;赵舒欣;王文卓;黎冠忠 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12N15/53;C12N15/52;C12P7/42;C12R1/19 |
代理公司: | 31230 上海三和万国知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 张民华 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 乙酸 乙酰 目标代谢产物 代谢途径 构建 代谢 脂肪酸合成途径 大肠杆菌菌株 基因工程手段 大肠杆菌 乙醛酸循环 脂肪酸合成 代谢工程 能量代谢 外源表达 羟基丙酸 培养基 还原酶 得率 菌株 羧化 生产 改造 调控 分析 | ||
1.一种利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法,其特征在于,在利用乙酸或其盐经乙酰-CoA羧化酶和丙二酰-CoA还原酶生产3-羟基丙酸代谢途径的基础上进一步改造,所述进一步改造包括以下两种途径中的一种或两种:(1)抑制脂肪酸合成并促进乙醛酸循环以增加流向目标代谢产物的乙酰-CoA和丙二酰-CoA代谢流并增强能量代谢;(2)抑制脂肪酸合成途径以增加流向目标代谢产物的乙酰-CoA和丙二酰-CoA代谢流。
2.根据权利要求1所述的一种利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法,其特征在于,所述利用乙酸或其盐经乙酰-CoA羧化酶和丙二酰-CoA还原酶生产3-羟基丙酸代谢途径是指,过表达来源于谷氨酸棒杆菌的乙酰-CoA羧化酶编码基因(dtsR1和accBC)与来源于绿曲绕丝状菌(C.aurantiacua)丙二酰-CoA还原酶编码基因(mcr)。
3.根据权利要求1所述的一种利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法,其特征在于,所述乙酸或其盐是指乙酸或者乙酸盐,所述乙酸盐包括乙酸钠和乙酸铵中的一种或两种。
4.根据权利要求1所述的一种利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法,其特征在于,所述进一步改造包括以下两种途径中的一种或两种:
(1)宿主菌敲除fadR;
(2)过表达fabR。
5.根据权利要求1所述的一种利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法,其特征在于,所述进一步改造是指宿主菌敲除fadR并过表达fabR。
6.根据权利要求1所述的一种利用乙酸或其盐生产3-羟基丙酸的代谢工程大肠杆菌菌株的构建方法,其特征在于,所述进一步改造是指宿主菌敲除fadR或者过表达fabR。
7.权利要求1—6任一所述构建方法得到的代谢工程大肠杆菌菌株。
8.利用权利要求1—6任一所述构建方法得到的代谢工程大肠杆菌菌株在以乙酸或其盐为碳源发酵生产3-羟基丙酸中的应用。
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