[发明专利]美洲大蠊的鉴别方法

权利要求书

1.一种美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，其包括下述步骤：

(1)将待测样本经胰蛋白酶酶解处理，制成供试品溶液；

(2)对所述供试品溶液进行液质联用检测，以确定所述待测样本是否为美洲大蠊；

其中，采用电喷雾正离子模式进行多反应监测，以①和/或②的特征肽段离子对进行MRM扫描；

①质荷比510.8双电荷→369.0、质荷比510.8双电荷→239.9；

②质荷比627.3三电荷→603.5、质荷比627.3三电荷→516.7；

所述液质联用检测中的液相色谱的条件如下：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

以乙腈为流动相A，以0.05-0.2％甲酸溶液为流动相B；

梯度洗脱：0→12min，流动相A为10％；12→20min，流动相A为10％→30％；20→25min，流动相A为30％；

流速为0.2mL/min。

2.如权利要求1所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，所述待测样本为药材或片剂，先进行预处理，再进行酶解处理。

3.如权利要求2所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，所述待测样本为药材，所述预处理操作包括下述操作：将药材与乙醚混合超声，过滤，干燥；再与乙醇混合超声，离心后干燥，即可。

4.如权利要求2所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，所述待测样本为片剂，所述预处理包括下述操作：将片剂研磨成细颗粒，即可。

5.如权利要求1-4任一项所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，步骤(1)中，所述酶解处理的溶剂为碳酸氢铵溶液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液或磷酸盐缓冲液；

和/或，步骤(1)中，所述酶解处理所用的酶为胰蛋白酶。

6.如权利要求5所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，所述酶解处理包括下述步骤：

1)将液体待测样品或者经预处理的固体待测样品，与碳酸氢铵溶液混合超声，过滤；

2)滤液和胰蛋白酶混合，进行酶解反应，即可。

7.如权利要求6所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，步骤1)中，所述样品与碳酸氢铵溶液的混合比例为(1.5-15)g/20mL；

和/或，步骤1)中，所述碳酸氢铵溶液的质量浓度为0.5-2％；

和/或，步骤1)中，所述过滤采用微孔滤膜进行。

8.如权利要求6所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，步骤2)中，所述胰蛋白酶以胰蛋白酶溶液的形式进行混合，所述滤液与胰蛋白酶溶液的体积比为10：(1.25-5.0)；

和/或，步骤2)中，所述酶解反应的时间为12-24小时；

和/或，步骤2)中，所述酶解反应的温度为37℃。

9.如权利要求5所述的美洲大蠊的鉴别方法，其特征在于，步骤(1)中，待测样本为药材，在所述酶解处理后，还进行后处理操作以去除杂质；所述后处理的方法为：将酶解后的反应液过固相萃取柱，取过柱液作为供试品溶液。