[发明专利]一种用于发酵扩充制备活菌制剂的菌种监控方法在审
| 申请号： | 201910933875.X | 申请日： | 2019-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN110628676A | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 郑燕鹏 | 申请（专利权）人： | 郑燕鹏 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/10 |
| 代理公司： | 32266 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 100010 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菌种 发酵 活菌制剂 涂片 摇瓶 接种 繁殖 地衣芽孢杆菌 发酵种子罐 旺盛生长期 稳定性增强 菌体浓度 温度梯度 形态判断 芽孢形成 液培养基 培养基 芽孢率 种子罐 种子液 监控 短链 菌体 扩增 冷藏 制备 取出 复苏 分裂 时机 观察 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于发酵扩充制备活菌制剂的菌种监控方法，其特征在于，操作包括：
(1)选取芽孢率在70％以上且菌体浓度≥109CFU/mL的菌种；
(2)自冷藏取出后，进行温度梯度复苏；
(3)在摇瓶的种子液或种子罐扩增发酵繁殖至旺盛生长期的后期时转移；
(4)待接种的摇瓶液培养基或发酵种子罐培养基在接种时，温度设在菌体分裂繁殖温度30～37℃范围内。
2.根据权利要求1所述的一种用于发酵扩充制备活菌制剂的菌种监控方法，其特征在于，所述活菌制剂为地衣芽孢杆菌活菌制剂。
3.根据权利要求1所述的一种用于发酵扩充制备活菌制剂的菌种监控方法，其特征在于，所述菌种可以选自冻干菌种、斜面菌种、平板菌种或其他保存形式的菌种中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的一种用于发酵扩充制备活菌制剂的菌种监控方法，其特征在于，步骤(2)，所述温度梯度复苏包括两个阶段，先在20～25℃恢复适应存放4～8小时，再在菌体分裂繁殖温度30～37℃范围内存放6～12小时。
5.根据权利要求1所述的一种用于发酵扩充制备活菌制剂的菌种监控方法，其特征在于，步骤(3)，所述旺盛生长期的后期是指通过涂片镜捡观察到2/3以上菌种的形态为单体或短链。
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