[发明专利]一种簇毛麦染色体特异的寡聚核苷酸探针及其应用有效
申请号: | 201910935075.1 | 申请日: | 2019-09-29 |
公开(公告)号: | CN110747287B | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 王海燕;周佳雯;雷佳;孙昊杰;万文涛;肖进;袁春霞;王秀娥 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 簇毛麦 染色体 特异 核苷酸 探针 及其 应用 | ||
1.一种簇毛麦染色体特异的寡聚核苷酸探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的寡聚核苷酸探针,其特征在于,用荧光标记物标记该寡聚核苷酸探针。
3.根据权利要求2所述的寡聚核苷酸探针,其特征在于,所述的寡聚核苷酸探针5’末端用6-FAM或TAMRA荧光基团标记。
4.权利要求2~3中任一项所述的寡聚核苷酸探针在检测簇毛麦染色体中的应用。
5.权利要求2~3中任一项所述的寡聚核苷酸探针在检测小麦遗传背景中簇毛麦染色体中的应用。
6.一种杂交液,其特征在于包括权利要求2~3中任一项所述的寡聚核苷酸探针和缓冲液;所述的缓冲液含有去离子甲酰胺dFA,鲑鱼精DNA ssDNA, 20×柠檬酸钠缓冲液SSC及50%硫酸葡聚糖DS。
7.根据权利要求6所述的杂交液,其特征在于,所述的杂交液是由权利要求2~3中任一项所述的寡聚核苷酸探针和缓冲液组成;杂交液中所用探针和缓冲液的最终浓度为:权利要求2~3中任一项所述的寡聚核苷酸探针3.3μmol/μL,50%去离子甲酰胺dFA,0.3 μg/μL鲑鱼精DNA ssDNA,2×柠檬酸钠缓冲液SSC,10%硫酸葡聚糖DS。
8.权利要求6所述的杂交液在检测簇毛麦染色体中的应用。
9.权利要求6所述的杂交液在检测小麦遗传背景中簇毛麦染色体中的应用。
10.一种检测小麦遗传背景中簇毛麦基因组、整条染色体或整臂染色体的办法,其特征在于包括:进行小麦染色体制片,加入权利要求6所述的杂交液进行原位杂交,洗脱后在荧光显微镜下观察,用CCD相机拍摄图像,如果小麦遗传背景中含有簇毛麦基因组、整条染色体或整臂染色体,则会产生强而清晰的杂交信号;如果小麦遗传背景中不含有簇毛麦基因组、整条染色体或整臂染色体则不会产生任何杂交信号。
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