[发明专利]咖啡酸作为漆酶降解霉菌毒素的介体的应用

说明书

本发明属于农业生物领域，具体涉及参与枯草芽孢杆菌来源漆酶降解霉菌毒素的高效介体的应用。本发明提供了一种可用于霉菌毒素降解的高效漆酶介体。本发明的介体能够协助枯草芽孢杆菌来源漆酶有效地降解不同结构类型的霉菌毒素，广泛用于食品和饲料霉菌毒素脱毒领域。

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，具体涉及咖啡酸作为漆酶降解霉菌毒素的介体的应用。

背景技术

霉菌毒素是真菌产生的次级代谢产物，主要污染储存的粮油食品和饲料，严重危害人畜健康。根据其结构特征，霉菌毒素可分为芳香环和非芳香环两大类，芳香环类包括黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、桔霉素、赭曲霉素、棒曲霉素和单端孢霉烯族毒素等；非芳香环类仅包括伏马毒素。其中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)是最为常见和危害最大的霉菌毒素。因此，亟需建立简单、有效且环境友好的霉菌毒素的脱毒方法。

目前，被霉菌毒素污染的饲料的脱毒方法主要包括物理法、化学法、吸附法和生物法等。物理和化学脱毒法存在操作困难、效果不稳定、营养成分损失大以及影响饲料适口性等缺点。吸附法虽简单易行，但存在用量大、不够经济，容易引起二次污染等缺点。微生物脱毒法具有作用条件温和，对原料的感官性状、适口性等影响极小、增加原料营养价值等优点，被认为是最佳脱毒方法。生物脱毒作用主要是指降解酶通过酶促反应将毒素转化成低毒或者无毒产物，其中降解酶包括氧化酶如漆酶、锰过氧化物酶和水解酶(如酯酶)等。

生物脱毒技术实现规模化应用的过程中，寻找和筛选能降解霉菌毒素的菌株，并对其所产胞外降解酶进行特性研究及对降解酶基因进行克隆和表达，是霉菌毒素生物降解研究领域重要的突破点和发展方向。因此，建立酶法降解霉菌毒素的高效降解体系是生物脱毒技术的关键所在。

现有漆酶对霉菌毒素的降解率普遍较低。据文献报道，利用漆酶-介体体系进行染料脱色时，介体的效果取决于被处理染料的类型。如，白腐菌漆酶能够以HBT作为介体有效降解酸性红73。利用云芝漆酶进行农药降解时，不同农药底物也表现出了对介体的选择性，如降解嘧霉胺和异丙隆时，效果最好的介体是紫脲酸，乙酰丁香酮和HBT则是降解百菌清和草脱净时效果最佳的介体。由此可见，漆酶的适当介体因其降解底物性质的差异而显著不同。

发明内容

本发明的目的在于提供咖啡酸作为参与枯草芽孢杆菌来源漆酶降解霉菌毒素的高效介体的应用。

根据本发明具体实施方式的咖啡酸作为参与漆酶降解霉菌毒素的介体的应用，其中，所述漆酶来自枯草芽孢杆菌，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

根据本发明具体实施方式，所述霉菌毒素为黄曲霉毒素B₁和/或玉米赤霉烯酮。

根据本发明具体实施方式，在缓冲溶液中对黄曲霉毒素B₁和玉米赤霉烯酮进行高效降解，所述缓冲液为浓度50mM、pH 7.0的Tris-HCl溶液。

根据本发明的提高漆酶降解霉菌毒素的降解率的方法，包括使用咖啡酸作为参与漆酶降解霉菌毒素的介体的步骤，其中，所述漆酶来自枯草芽孢杆菌，其氨基酸序列如SEQID No.1所示。

根据本发明具体实施方式，所述霉菌毒素为黄曲霉毒素B₁和/或玉米赤霉烯酮。

根据本发明具体实施方式，在缓冲溶液中对黄曲霉毒素B₁和玉米赤霉烯酮进行高效降解，所述缓冲液为浓度50mM、pH 7.0的Tris-HCl溶液。

本发明的方法能够高效降解霉菌毒素、成本低、适用范围广，可广泛用于饲料毒素降解酶领域。

附图说明

图1显示枯草芽孢杆菌来源漆酶-咖啡酸体系对黄曲霉毒素B₁和玉米赤霉烯酮的降解作用。