[发明专利]一种利用虎奶菇生物合成纳米硒的方法

权利要求书

1.一种生产纳米硒的方法，其特征在于，在虎奶菇（Pleurotus tuber-regium）的发酵过程中，转化四价无机硒盐生产纳米硒；所述方法在接种虎奶菇种子液后，发酵至4-6 d时，向发酵体系中加入浓度为0.3-20 mM的Na₂SeO₃溶液，继续发酵至总时间7-9d，收集发酵产物，并从中分离和/或纯化纳米硒。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

（1）用PDA培养基对虎奶菇菌种进行活化；

（2）将步骤（1）活化获得的虎奶菇菌丝转接至种子培养基中，于26-32℃培养3-5 d；

（3）将步骤（2）培养的种子液按体积计转接1~15%至发酵培养基中，26-32℃，150-200rpm发酵4-6 d时，向发酵体系中加入浓度为0.3-20 mM的Na₂SeO₃溶液，继续发酵至总时间7~9 d；

（4）收集发酵产物，并从中分离和/或纯化纳米硒。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将发酵液过30目筛，收集虎奶菇菌体，用去离子水清洗3-5遍，对菌体细胞进行破碎，收集菌体裂解液；将菌体裂解液于5000-8000 rpm离心10-20 min，收集沉淀并以无菌生理盐水分散清洗，于5000-8000 rpm离心20-30 min，清洗过程重复3遍；将沉淀重悬于20 mL去离子水中，经截留分子量3000 Da透析袋透析后，冷冻干燥，得纳米硒干粉。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将发酵液过30目筛，收集虎奶菇菌体，用去离子水清洗3-5遍，再将虎奶菇菌体冷冻干燥，磨粉过80目筛，得纳米硒干粉。

5.应用权利要求1~4任一所述方法制备的纳米硒产品。

6.应用权利要求1~4任一所述方法发酵获得的虎奶菇发酵产物。