[发明专利]壳聚糖硒降低F-2毒素致猪子宫内膜上皮细胞CASP3蛋白表达升高的应用在审

专利信息
申请号: 201910942802.7 申请日: 2019-09-30
公开(公告)号: CN110777110A 公开(公告)日: 2020-02-11
发明(设计)人: 秦顺义;王欢欢;李元辉;李留安;马吉飞;张建斌;金天明 申请(专利权)人: 天津农学院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071;G01N33/573
代理公司: 12209 天津盛理知识产权代理有限公司 代理人: 韩晓梅
地址: 300380 *** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 子宫内膜上皮细胞 毒素 壳聚糖 蛋白表达 培养液 升高 毒性作用 理论支持 体外培养 体外研究 应用提供 预防 治疗 应用
【说明书】:

本发明公开壳聚糖硒在抑制F‑2毒素所致猪子宫内膜上皮细胞CASP3(Caspase‑3)蛋白表达升高方面的应用。实验结果显示:对于子宫内膜上皮细胞,使用1.0‑3.0μmol/L的壳聚糖硒(在培养液中的终浓度,以硒计),在F‑2毒素浓度为20‑40μg/mL,可抑制F‑2毒素所致猪子宫内膜上皮细胞Caspase‑3蛋白表达升高,以此达到减弱F‑2毒素对体外培养的猪子宫内膜上皮细胞的毒性作用,为壳聚糖硒在预防和治疗猪F‑2毒素中毒方面的应用提供体外研究模型和理论支持。

技术领域

本发明属于生物技术领域,涉及细胞工程技术,尤其是一种壳聚糖硒降低F-2毒素致猪子宫内膜上皮细胞CASP3(Caspase-3)蛋白表达升高的应用和方法。

背景技术

F-2毒素,也称玉米赤霉烯酮,是由禾谷镰刀菌产生,是二羟基苯酸内酯化合物,与雌二醇结构相似,具有雌激素样活性,是世界上污染农作物范围最为广泛真菌毒素之一。国内外大量研究证明,F-2毒素具有生殖毒性、细胞毒性、免疫毒性以及致癌作用。长期饲喂F-2毒素污染的饲料会导致畜禽生长性能下降、免疫功能低下和繁殖机能障碍。

研究表明,F-2毒素对猪空肠上皮细胞、鸡脾淋巴细胞、大鼠睾丸间质细胞、小鼠子宫内膜基质细胞、猪卵巢颗粒细胞、大鼠子宫内膜细胞、猪子宫内膜细胞等均具有细胞毒性,可以抑制细胞增殖,导致细胞的凋亡。细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段:接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→进入连续反应过程。Caspase全称为含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶,与真核细胞凋亡密切相关,并参与细胞的生长、分化与凋亡调节。Caspase分为两类,一类是起始者(initiators),另一类是执行者(executioners)。起始Caspase在外来蛋白信号的作用下被切割激活,激活的起始Caspase对执行者Caspase进行切割并使之激活,被激活的执行者Caspase通过对Caspase靶蛋白的水解,导致程序性细胞死亡。Caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶,也是CTL细胞杀伤机制的重要组成部分。Caspase-3基因和蛋白表达升高时细胞凋亡增多,Caspase-3基因和蛋白表达降低时细胞凋亡减少,因此Caspase-3基因和蛋白表达量的高低在一定程度上可反映毒素对细胞毒性作用的强弱。研究表明,F-2毒素可导致鸡脾淋巴细胞、人肝癌HepG2细胞、猪卵巢颗粒细胞、大鼠睾丸支持细胞以及猪子宫内膜细胞Caspase-3基因和蛋白表达水平显著提高,并以此来体现其对相应细胞的毒性作用。

硒是动物和人所必需的微量元素。硒的抗氧化、提高机体免疫力和抗病力,调节机体代谢,影响动物和人的繁育机能,抗肿瘤,延缓衰老,拮抗有毒元素等多种生物学功能已为人们所共知。壳聚糖是从低等的生物菌类、藻类的细胞、节支动物虾蟹昆虫的外壳中提取的天然高分子聚合物,具有抗衰老、抗氧化、抗癌、抗风湿、抗病毒、抗肿瘤、增强机体免疫活性、诱导细胞分化等作用。壳聚糖硒是硒与壳聚糖的有机化合物,能同时发挥有机硒和壳聚糖的抵抗氧化,保护细胞膜,抑制过氧化物,提高机体抵抗氧化损伤的作用;在生产实践中,壳聚糖硒还能不同程度提高畜禽的生产性能、免疫力、抗氧化能力,降低重金属对机体的蓄积毒性,也可抵抗肿瘤、诱导细胞凋亡、降血糖和血脂。

目前,国内外未见到壳聚糖硒抑制F-2毒素所致猪子宫内膜上皮细胞Caspase-3蛋白表达升高方面的专利公开文献或报道。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术中的不足之处,提供一种壳聚糖硒降低F-2毒素致猪子宫内膜上皮细胞Caspase3蛋白表达升高的应用和方法,为壳聚糖硒在预防和治疗猪F-2毒素中毒方面的应用提供体外研究模型和理论支持。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:

壳聚糖硒在抑制F-2毒素所致猪子宫内膜上皮细胞Caspase-3蛋白表达升高方面中的应用。

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