[发明专利]一种抗C反应蛋白的抗体

说明书

本发明涉及一种新颖的包含CRP抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。本发明公开的结合蛋白包括至少一个互补决定区：或；与互补决定区具有至少80％的序列同一性且与C反应蛋白具有KD≤7.43×10^‑10mol/L的亲和力。所述结合蛋白活性强，与人CRP蛋白具有很高的亲和力，可广泛应用于CRP蛋白的检测领域。

技术领域

本发明涉及免疫技术领域，具体而言，涉及一种抗C反应蛋白的抗体。

背景技术

C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是急性时相反应蛋白之一，1930年美国洛克菲勒研究院AVERY实验室的Tillett和Fransic发现急性感染患者的血清能和肺炎双球菌细胞壁上的C多糖发生沉淀反应，后证实参与反应的是一种蛋白质，故称之为C反应蛋白。CRP属于穿透素家族成员之一，相对分子质量为115KD-140KD，它由5个相同的亚单位以非共价键形式结合，形成对称的环状五球体，中间环绕一孔型结构其凹面含有配体结合位点，每个亚单位有206个氨基酸残。炎症、感染、组织损伤时，在细胞因子(如白细胞介素-6、肿瘤坏死因子)等的刺激下，CRP主要由肝脏合成后存在于人的血液中，在血液中的半衰期大概为19h。此外，外周血淋巴细胞也能合成少量的CRP。

CRP具有多种生物学功能，参与多种自身生理及病理生理过程。CRP与磷脂胆碱残基具有高度亲和力，并且可以和多种自身配体(如浆细胞脂蛋白、损伤细胞的细胞膜、小核糖体蛋白颗粒和调理素细胞等)或外来配体(如多聚糖、磷脂以及细菌、真菌、寄生虫等微生物的组分)相结合。CRP与这些配体结合后，仅能激活补体活化经典途径的初级阶段，限制补体激活晚期炎症反应的发展及强度。此外，CRP还能增加淋巴细胞活性，增强巨噬细胞对各种细菌和异物的吞噬能力，抑制血小板凝集及抗炎等作用。

CRP是急性时相反应蛋白中变化最显著的一种，也是人体感染的一个重要的标志物。CRP虽然是一个非特异性的标志物，但它与一些感染性疾病、心血管疾病、自身免疫病、恶性肿瘤和抑郁症等疾病的发生发展存在很大的相关性，具体例如：

血清CRP水平是指示细菌感染的一项敏感而客观的指标。通常情况下，机体CRP浓度较低，新生儿血清CRP2mg/L，儿童和正常成年人血清中CRP≤10mg/L。在感染性疾病疾病中，CRP浓度可在6-8h内迅速上升，24-48h达到高峰。高峰值可达正常值的数百倍。而在感染消除后又急剧下降，一周内即可恢复正常。

CRP水平还与感染范围和感染严重程度有一定关系。各种细菌感染均可引起CRP水平的升高，10-99mg/L提示局灶性或浅表性感染，≥100mg/L提示败血症或侵袭性感染等严重情况。因此，血清CRP水平可以用来预测感染性疾病的严重程度、住院时间的长短、预后及复发。

CRP可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断。细菌感染时CRP水平显著上升，而病毒感染时CRP水平多正常或轻度升高，因此CRP还可以帮助细菌感染与非细菌感染的鉴别诊断。

CRP在大多数结缔组织病的活动期均可升高。结缔组织病多为自身免疫病，包括系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎等，虽然病因、病理及表现形式和治疗方式各不相同，但自身免疫性炎症在疾病的发生和发展过程中发挥重要作用。CRP是类风湿性关节炎早期关节破坏及预后的重要预测指标之一。

CRP可以反映动脉粥样硬化斑块的成分并预测斑块破裂的可能性，是心血管疾病的独立预测因子。冠心病、急性冠脉综合症患者的CRP水平明显升高，其升高水平与冠状动脉硬化阻塞程度、冠心病终末事件的发生及预后、充血性心力衰竭的程度均有显著相关性。

恶性肿瘤患者的CRP水平大都增高，CRP与AFP的联合检测可用于肝癌和肝脏良性疾病的鉴别诊断。CRP对于肿瘤的治疗和手术效果的评估具有重要意义，有助于临床评估肿瘤的进程。