[发明专利]一种淫羊藿复合物产品质量控制及指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种淫羊藿复合物产品质量控制及指纹图谱检测方法，其特征在于，对复合物原料的产品质量控制及指纹图谱检测方法为：

S1，淫羊藿苷：

a、标准品溶液制备，取10mg淫羊藿苷标准品于10ml容量瓶中，加甲醇溶解，定容；

b、提取物样品溶液制备，取淫羊藿提取物0.1g，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，再次称定重量，甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，静置，取上清液；

c、含量测定，

色谱条件：

流动相A为乙腈，流动相B为水，乙腈：水＝30:70，等度洗脱；

检测波长为270nm，柱温30℃，流速为1ml/min，进样量为10μl，进样两次；

等度洗脱条件为：

d、标准曲线制作，按1/2梯度稀释标准品溶液，得到5个浓度梯度，按色谱条件进行分析，绘制标准曲线；

取提取物样品溶液，按色谱条件进行分析，通过标准曲线计算淫羊藿苷含量；

淫羊藿提取物指纹图谱条件：

①精确称取0.1g淫羊藿提取物于50ml容量瓶中，加甲醇溶解，超声30min，放置至室温，定容，过滤，浓缩，过膜；

②色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速1ml/min，波长269nm，柱温30℃，进样体积：10μl，进样1次；

S2，丹参酮IIA：

a、标准品溶液制备，取6mg丹参酮IIA标准品于10ml容量瓶中，加甲醇溶解，定容；

b、提取物样品溶液制备，取丹参提取物0.1g，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，再次称定重量，甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，静置，取上清液；

c、含量测定，

色谱条件：

流动相A为乙腈，流动相B为水，梯度洗脱；

检测波长为270nm，柱温20℃，流速为1ml/min，进样量为10μl，进样两次；

梯度洗脱条件为：

d、标准曲线制作，按1/2梯度稀释标准品溶液，得到5个浓度梯度，按色谱条件进行分析，绘制标准曲线；

取提取物样品溶液，按色谱条件进行分析，通过标准曲线计算丹参酮IIA含量；

丹参提取物指纹图谱条件：

①精确称取0.1g丹参提取物于50ml容量瓶中，加甲醇溶解，超声30min，放置至室温，定容，过滤，浓缩，过膜；

②色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速1ml/min，波长270nm，柱温室温，进样体积：10μl，进样1次；

S3，原薯蓣皂苷：

a、标准品溶液制备，取8mg原薯蓣皂苷标准品于10ml容量瓶中，加甲醇溶解，定容；

b、提取物样品溶液制备，取穿山龙提取物0.1g，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，再次称定重量，甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，静置，取上清液；

c、含量测定，

色谱条件：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相A为乙腈，流动相B为水，乙腈：水＝37:63，等度洗脱；

检测波长为203nm，柱温30℃，流速为1ml/min，进样量为10μl，进样两次；

等度洗脱条件为：

取标准品溶液和提取物样品溶液，按色谱条件进行分析，通过单点法计算原薯蓣皂苷的含量；

穿山龙提取物指纹图谱条件：

①精确称取0.1g穿山龙提取物于50ml容量瓶中，加甲醇溶解，超声30min，放置至室温，定容，过滤，浓缩，过膜；

②色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速1ml/min，波长210nm，柱温30℃，进样体积：10μl，进样1次；

其中，对淫羊藿复合物的产品质量控制及指纹图谱检测方法为：

1)色谱条件1指纹图谱检测：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；

流动相A为乙腈，流动相B为水，梯度洗脱；

检测波长为210-270nm，柱温30℃，流速为1ml/min，进样量为10μl；梯度洗脱条件为：

色谱条件2产品含量检测：

流动相A为乙腈，流动相B为水，乙腈：水＝30:70，梯度洗脱；

检测波长为270nm，柱温30℃，流速为1ml/min，进样量为10μl，进样两次；

2)供试品制备

精密称量淫羊藿复合物1g，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇500ml，称定重量，超声处理30min，再次称定重量，甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，浓缩滤液至50ml，静置，取上清液；

其中，所述淫羊藿复合物由如下重量份的原料组成：氨糖1.2份、胶原0.4份、硫酸软骨素0.2份、中药提取物0.35份；所述中药提取物的组成按重量份数计：淫羊藿7-12份、丹参0.5-3份、穿山龙6.5-9份、骨碎补1-5份、菟丝子1-5份；

3)标准品溶液制备

取10mg淫羊藿苷标准品于10ml容量瓶中，加甲醇溶解，定容；

标准曲线制作：对标准品溶液进行1/2梯度稀释，得到5个浓度梯度，分别为0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0mg/ml，按色谱条件2进行分析，绘制标准曲线；

取步骤S2所得上清液，按色谱条件2进行分析，通过标准曲线计算含量；

取步骤S2所得上清液，按色谱条件1进行分析，得到指纹图谱。