[发明专利]用于毛发再生的含有诱导的外泌体的组合物

权利要求书

1.一种具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，包括：

向细胞直接/间接提供超声波刺激的步骤；

以规定时间培养所述细胞及培养基的混合物的步骤；以及

从所述混合物分离外泌体的步骤，

其中，直接提供刺激是指向含有细胞的培养基施加超声波刺激，间接提供刺激是指向未含有细胞的培养基施加超声波刺激之后，混合所述培养基和所述细胞。

2.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述向细胞直接/间接提供超声波刺激的步骤通过选自以下方式中的任一种方式来执行：

在混合细胞和培养基之后，向所述混合物提供超声波刺激；或者

在向培养基提供超声波刺激之后，混合所述培养基和细胞；或者

在向细胞提供超声波刺激之后，混合所述细胞和培养基；或者

在向细胞提供超声波刺激之后，混合所述细胞和培养基，然后向所述混合物提供超声波刺激；或者

在向培养基提供超声波刺激之后，混合所述培养基和细胞，然后向所述混合物提供超声波刺激；或者

在分别向细胞和培养基提供超声波刺激之后，混合所述细胞及所述培养基；或者

在分别向细胞和培养基提供超声波刺激之后，混合所述细胞及所述培养基，然后向所述混合物提供超声波刺激。

3.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

直接的所述超声波刺激的强度为0.1至3W/cm²，频率为20kHz至20MHz，持续时间为0.1秒至20分，

间接的所述超声波刺激的强度为1至20W/cm²，频率为20kHz至20MHz，持续时间为0.1秒至20分。

4.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述细胞选自由各种哺乳类来源的干细胞、祖细胞、成纤维细胞、角质细胞或者器官内的组织细胞构成的组。

5.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述培养基是胚胎干细胞培养基、毛乳头细胞培养基或者毛囊干细胞培养基中的任一种。

6.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述混合物的培养进行1小时至10天。

7.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述分离外泌体的步骤中，利用超离心、密度梯度、过滤、尺寸排除色谱法、免疫亲和分离、沉淀、基于微流体的分离方法中的一个以上。

8.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述分离外泌体的步骤包括：

通过对培养后的所述混合物进行离心分离来获取上清液的步骤；

利用过滤器过滤所述上清液，由此获取过滤液的步骤；以及

对所述过滤液进行浓缩的步骤。

9.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所述分离外泌体的步骤还包括：

利用过滤器过滤所述上清液之前，在4℃以下的条件下保管3个月以内的时间的步骤。

10.根据权利要求1所述的具有毛发再生效果的外泌体的制备方法，其特征在于，

所分离的所述外泌体的直径为50至200nm。

11.一种具有毛发再生效果的外泌体，其特征在于，

所述外泌体根据权利要求1所述的制备方法制备。