[发明专利]蛋白印迹膜片抗体孵育装置及其方法在审
申请号: | 201910959618.3 | 申请日: | 2019-10-10 |
公开(公告)号: | CN112649611A | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 魏佑震;唐文洁 | 申请(专利权)人: | 上海积发生物科技有限公司;赛脉笛生物医学(苏州)有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/531 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 成春荣;竺云 |
地址: | 201422 上海市奉贤*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白 印迹 膜片 抗体 孵育 装置 及其 方法 | ||
本申请涉及生物科学及医学研究,公开了一种蛋白印迹膜片抗体孵育装置及其方法。该装置包括至少一个器皿,用于进行封闭反应、第一抗体反应、第二抗体反应和清洗操作;夹持组件,用于在各反应或清洗操作时,夹持膜片浸入在反应液或清洗液器皿中;以及运动组件,用于在各反应或清洗操作时做预设幅度的运动,以使该夹持组件所夹持的膜片在器皿中相对器皿做该预设幅度的运动。本申请的实施方式使孵育过程自动化和标准化,避免实验批次间误差,缩短实验周期,提高实验结果的可靠性和准确性。
技术领域
本申请涉及生物科学及医学研究,特别涉及蛋白质分析化学,及蛋白印迹膜片抗体孵育技术。
背景技术
蛋白质是生命活动的执行者和生命功能的体现者,蛋白质化学技术是生命科学、生物科学、基础医学的基本认识和研究手段。生命体中蛋白质的种类数量数以万计;蛋白质孵育以后,又会经历磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化等等化学修饰。
蛋白质从生命体(无论是单细胞或多细胞生命)庞杂的体系中,分离、纯化、鉴定、定性、定量,是蛋白质分析化学的基本技术方法。其中,在“分离”蛋白质时,凝胶电泳是较常用的技术方法,可以在蛋白质混杂体系内,根据不同蛋白质的分子量和带电负荷的不同,在电场的作用下,将蛋白质初步分离开。由于具有相同或相近分子量和带电电荷的蛋白质的存在,单独靠凝胶电泳,依然不能完全将目标蛋白分离,所以,一般会在此基础上,利用抗原抗体免疫结合的方法,实现对特异性抗原(蛋白)的定性、定量、甚至是捕获。
为了能够让蛋白与抗体结合有一个固相载体,一般将电泳之后的凝胶上分离过的蛋白,通过电场的强力驱使,转移到PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜、硝酸纤维素膜NC上。为了显示蛋白的存在以及数量的多少,一般地,会在抗体上加载发光基团,以便可见。从蛋白凝胶电泳分离到蛋白在膜上被看到,这个过程就是“蛋白印迹技术,Western Bott”,其中负载有蛋白的PVDF或者NC膜,自从凝胶“转膜”之后的过程,统称为“孵育”。
目前,“孵育”过程是依靠人工操作,而“孵育”又多是简单的重复性劳动,工序繁杂、耗时耗工、周期较长,由于技术条件和过程的非标化,往往造成实验批次之间的交大误差。
发明内容
本申请的目的在于提供一种蛋白印迹膜片抗体孵育装置及其方法,使孵育过程自动化和标准化,避免实验批次间误差,缩短实验周期,提高实验结果的可靠性和准确性。
本申请公开了一种蛋白印迹膜片抗体孵育装置,包括:
至少一个器皿,用于进行封闭反应、第一抗体反应、第二抗体反应和清洗操作;
夹持组件,用于在各反应或清洗操作时,夹持膜片浸入在反应液或清洗液器皿中;
运动组件,用于在各反应或清洗操作时做预设幅度的运动,以使所述夹持组件所夹持的膜片在器皿中相对器皿做所述预设幅度的运动。
在一个优选例中,该运动组件是设置在各器皿底部的运动平台,或者该运动组件是与所述夹持组件固定连接的移动组件。
在一个优选例中,所述至少一个器皿为单个器皿,所述封闭反应、第一抗体反应、第二抗体反应和清洗操作都在该器皿中进行;
所述孵育装置还包括:
至少四个储液容器,其中三个储液容器用于存放封闭反应液、第一抗体反应液、第二抗体反应液,剩余的至少一个储液容器用于存放清洗液;
注液装置,用于将特定储液容器中的液体注入到相应器皿中;
至少一个废液容器,用于盛放各反应废液和清洗废液;
排液装置,用于将器皿中的反应废液、清洗废液排出到废液容器中,以及将器皿中的反应液回收到相应储液容器中。
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