[发明专利]一种识别KRAS突变的T细胞受体及其编码序列

说明书

本发明提供了一种能够特异性结合KRASG12V突变(KRAS G12V)抗原的T细胞受体(TCR)，突变抗原短肽为VVGAVGVGK可与HLA A1101形成复合物，本发明TCR特异性结合上述复合物。本发明还提供了编码所述TCR的核酸分子以及包含所述核酸分子的载体。另外，本发明还提供了转导本发明TCR的细胞。

技术领域

本发明涉及能够识别源自KRAS G12V抗原短肽的TCR及其编码序列，本发明还涉及转导上述TCR来获得的KRAS G12V特异性的T细胞，及他们在预防和治疗KRAS G12V相关疾病中的用途。

背景技术

KRAS基因(p21基因)，是一种鼠类肉瘤病毒癌基因，长约35kb，位于12号染色体，是ras基因家族成员之一，编码KRAS蛋白。KRAS基因分为野生型或突变型。正常状态下，即野生型的KRAS能控制调控细胞生长的路径。而其一旦发生突变，则会持续刺激细胞生长，导致肿瘤的发生。KRAS基因常见的突变位点位于KRAS基因2号外显子的12号和13号的密码子上，其中G12V为7个常见突变位点之一(Chin J Lab Med.November 2012,Vol.35,No.11)。KRAS突变体(mKRAS)编码的KRAS蛋白将处于持续激活的状态，进而细胞增殖失控，导致肿瘤的形成。研究表明，KRAS-G12V与多种人类恶性肿瘤有关，包括但不限于，肺癌、结直肠癌(TumourBiol.2016May；37(5):6823-30)、胰腺癌、胃癌(J Cancer 2019；10(4):821-828)等，并且携带KRAS-G12V突变的肿瘤患者生存期最短(Br J Cancer.2015Oct 20；113(8):1206-1215)。VVGAVGVGK(SEQ ID NO:9)或VVVGAVGVGK(SEQ ID NO:38)是衍生自KRAS G12V抗原的短肽，是KRAS G12V相关疾病治疗的一种靶标。

T细胞过继免疫治疗是将对靶细胞抗原具有特异性的反应性T细胞转入病人体内，使其针对靶细胞发挥作用。T细胞受体(TCR)是T细胞表面的一种膜蛋白，其能够识别相应的靶细胞表面的抗原短肽。在免疫系统中，通过抗原短肽特异性的TCR与短肽-主组织相容性复合体(pMHC复合物)的结合引发T细胞与抗原呈递细胞(APC)直接的物理接触，然后T细胞及APC两者的其他细胞膜表面分子就发生相互作用，引起一系列后续的细胞信号传递和其他生理反应，从而使得不同抗原特异性的T细胞对其靶细胞发挥免疫效应。因此，本领域技术人员致力于分离出对KRAS G12V抗原突变短肽具有特异性的TCR，以及将该TCR转导T细胞来获得对KRAS G12V抗原短肽具有特异性的T细胞，从而使他们在细胞免疫治疗中发挥作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种识别KRAS G12V抗原短肽的T细胞受体。

本发明的第一方面，提供了一种T细胞受体(TCR)，所述TCR能够与VVGAVGVGK-HLAA1101复合物特异性结合。

在另一优选例中，所述TCR包含TCRα链可变域和TCRβ链可变域，所述TCRα链可变域的CDR3的氨基酸序列为ASLKGNNDMR(SEQ ID NO:12)；和/或所述TCRβ链可变域的CDR3的氨基酸序列为ASSSSRWEQQF(SEQ ID NO:15)。

在另一优选例中，所述TCRα链可变域的3个互补决定区(CDR)为：

αCDR1-DRVSQS(SEQ ID NO:10)

αCDR2-IYSNGD(SEQ ID NO:11)

αCDR3-ASLKGNNDMR(SEQ ID NO:12)；和/或

所述TCRβ链可变域的3个互补决定区为：

βCDR1-SGHVS(SEQ ID NO:13)

βCDR2-FQNEAQ(SEQ ID NO:14)