[发明专利]一种耐硼赖氨酸芽孢杆菌作为底盘细胞制备的水稻纹枯病杀菌剂

说明书

本发明涉及耐硼赖氨酸芽孢杆菌在抑制水稻纹枯病菌(Thanatephorus cucumeris)生长的应用。耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)不仅可以很大程度上降低水稻纹枯病的发生，而且于生态环境无任何威胁，有望作为合成生物学研究的优质底盘微生物，为水稻纹枯病的防治带来了新的方向。

技术领域

本发明涉及一种生防菌的合成生物学改造和应用，特别地涉及一种水稻纹枯病杀菌剂。

背景技术

“民以食为天，食以稻为先”。近5年来，我国水稻播种面积占粮食作物播种面积的27.5％左右，水稻单产比粮食作物平均单产高35.7％，稻谷产量占粮食总产的37.3％以上。水稻是我国单产最高、总产最多的粮食作物。全国65％以上人口以稻米为主食，生产的85％以上稻米作为口粮消费。一旦稻米供给不足，人民的生活就会受到影响，稻米供求的细小变化都会导致粮食价格乃至整个物价波动。水稻丰歉直接关系到粮食丰歉，水稻安全直接关系到国家粮食安全。

水稻纹枯病又称云纹病，是由水稻纹枯病菌(Thanatephorus cucumeris) 感染得病，多在高温、高湿条件下发生。纹枯病在南方稻区为害严重，是当前水稻生产上的主要病害之一。该病使水稻不能抽穗，或抽穗的秕谷较多，粒重下降。

常见的水稻纹枯病菌(Thanatephorus cucumeris)防治措施包括：清除菌核：稻田灌水后，捞出浮在水面上的菌核，集中消灭处理，以减少菌源。农业防治：使稻田干湿交替，如一般分蘖盛期前灌浅水，分蘖末期开始晒田，孕穗以后干湿交替，浅水勤灌，以降低田间湿度，减轻病害发生；或者多施有机肥，增施磷、钾肥，增强植株的抗病、抗倒能力。以上防治方法需消耗大量精力，且很难完全清除土壤中的全部致病菌，一旦致病菌再次泛滥，将带来不可估量的损失。化学防治：包括毒土防治，即将稻脚青(化学制剂)撒入稻田中，能抑制纹枯病菌菌丝的生长和萌发；药剂防治，例如喷洒井冈霉素等。但是化学药剂的生产成本本身较高，并且使用化学药剂杀菌后，随之而来的环境污染、农产品农药残留超标以及病原菌抗药性的形成等负面效应已经引起社会的广泛关注。

因此，近年来世界各国都在努力开发可替代传统化学药剂控制植物病害的新方法。其中利用微生物及其代谢产物进行生物防治，被公认为是一种环境友好型的选择。进一步地，利用合成生物学改造对水稻纹枯病菌具有生长抑制功能的生防菌，将其改造成高版本模式微生物底盘细胞，使其作为最小细胞工厂生产生物农药，将成为最为快捷有效的控制植物病害途径。

发明内容

针对现有技术中存在的技术问题，本发明提出了耐硼赖氨酸芽孢杆菌在抑制水稻纹枯病菌(Thanatephorus cucumeris)生长方面的应用，其中，所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)于2019年10月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏编号为CCTCC NO.M 2019773。

一种杀菌剂，包括：耐硼赖氨酸芽孢杆菌的发酵液，所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)于2019年10月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏编号为CCTCC NO.M 2019773；以及辅料。

如上所述的杀菌剂，所述辅料为水、液体培养基、固体培养基、甘油中的一种或者多种。

如上所述的杀菌剂，其中所述的耐硼赖氨酸芽孢杆菌的发酵液为硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)经24-96小时培养，OD₆₀₀为2.5-4.8 时的发酵液。