[发明专利]一种深色有隔内生菌根真菌菌剂组合体制备方法

权利要求书

1.一种深色有隔内生菌根真菌菌剂组合体制备方法，其特征在于，具体制备方法如下：

S1：选取野生一年生须根草本植物，将其根系洗净，剪成长1cm左右的根段；然后将镜检含有深色有隔内生菌根真菌菌丝的新鲜根段的两端切掉，并将根段切成0.3～0.5cm的根小段，再进行消毒；其中，一年生须根草本植物为栉齿黄鹌菜、泥胡菜和朝天委陵菜中的任一种；

S2：制备马铃薯葡萄糖琼脂固体培养体系、马铃薯葡萄糖液体培养体系和马铃薯葡萄糖琼脂双抗固体培养体系；所述马铃薯葡萄糖琼脂双抗固体培养体系中添加的抗性因子为氨苄青霉素和硫酸链霉素；

S3：将S1处理的根小段接种到马铃薯葡萄糖琼脂双抗固体培养体系上进行菌种分离培养；

S4：待根小段长出深色菌丝后，挑取成熟的深色菌丝接种在S2中制得的马铃薯葡萄糖琼脂固体培养体系表面进行纯化培养，并进行2次继代培养；

S5：制备菌种种子液；

S6：将种子液接种到马铃薯葡萄糖液体培养体系中进行发酵培养，获取发酵液和菌丝球；

S7：将发酵液和菌丝球制成10-12份干粉菌剂，并按照比例在干粉菌剂中加入保水剂70-75份、营养剂15-20份和缓释剂0.5-1.0份，充分混合均匀即得到深色有隔内生菌根真菌菌剂组合体；

其中，保水剂为灭菌后的硅藻土和孔隙岩颗粒，营养剂为灭菌后的组合腐殖土，缓释剂为聚丙烯酸酯。

2.根据权利要求1所述的一种深色有隔内生菌根真菌菌剂组合体制备方法，其特征在于：所述抗性因子的用量为每1000mL蒸馏水中加入50mg/L的氨苄青霉素和硫酸链霉素各100μL。

3.根据权利要求1所述的一种深色有隔内生菌根真菌菌剂组合体制备方法，其特征在于：所述S2中的马铃薯葡萄糖琼脂双抗固体培养体系上接种3-5个根小段。

4.根据权利要求1所述的一种深色有隔内生菌根真菌菌剂组合体制备方法，其特征在于：所述S6中的种子液的接种量为10%。