[发明专利]一种靶向CD19的T细胞抗原耦合器及其表达载体和应用

说明书

本发明公开了一种靶向CD19的T细胞抗原耦合器及其表达载体和应用，属于肿瘤免疫药物领域。所述靶向CD19的T细胞抗原耦合器，包括：依次连接的信号肽、靶向CD19的单链抗体、连接序列、靶向CD3的单链抗体、突变的CD8α铰链区、CD8α跨膜区、胞内区、P2A连接肽、IL2信号肽和抗PD1单链抗体分泌区，信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，靶向CD19的单链抗体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示，连接序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示，突变的CD8α铰链区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：4所示。该靶向CD19的T细胞抗原耦合器能降低T细胞治疗过程中产生的细胞因子风暴，同时分泌抗PD‑1的单链抗体，从而封闭PD‑1：PD‑L1/PD‑L2之间的免疫抑制信号。

技术领域

本发明涉及肿瘤免疫药物领域，特别涉及一种靶向CD19的T细胞抗原耦合器及其表达载体和应用。

背景技术

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一，据不完全统计，目前中国的恶性肿瘤年发病病例达到400多万例，其中淋巴瘤、白血病、多发性骨髓瘤等血液肿瘤的发病率居高不下。嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor，CAR)技术是近些年发展非常迅速的一种细胞治疗技术，用于治疗恶性肿瘤。目前，虽然CAR-T细胞可以有效的杀死肿瘤细胞，但同时也带来了细胞因子风暴的不良反应，严重时可导致患者死亡。因此，亟需一种安全的T细胞受体用于治疗恶性肿瘤。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种靶向CD19的T细胞抗原耦合器及其表达载体和应用。所述技术方案如下：

一方面，本发明提供了一种靶向CD19的T细胞抗原耦合器，包括：依次连接的信号肽、靶向CD19的单链抗体、连接序列、靶向CD3的单链抗体、突变的CD8α铰链区、CD8α跨膜区、胞内区和抗PD1单链抗体分泌区，所述信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，所述靶向CD19的单链抗体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示，所述连接序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示，所述突变的CD8α铰链区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：4所示，所述CD8α跨膜区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：5所示，所述胞内区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：6所示，所述P2A连接肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：7所示，所述IL2信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：8所示，所述抗PD1单链抗体分泌区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：9所示。

具体地，所述靶向CD3的单链抗体为UCHT1、OKT3、L2K或F6A。

优选地，所述靶向CD3的单链抗体为UCHT1，所述靶向CD3的单链抗体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：10所示。

另一方面，本发明提供了一种表达载体，所述表达载体包括载体和上述T细胞抗原耦合器。

具体地，所述载体为慢病毒载体。

又一方面，本发明提供了一种上述靶向CD19的T细胞抗原耦合器的应用，所述应用包括：将所述靶向CD19的T细胞抗原耦合器作为抗肿瘤药物。

具体地，所述肿瘤包括：急性淋巴细胞白血病、慢性B-淋巴细胞白血病、非霍奇金氏淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明提供了一种靶向CD19的T细胞抗原耦合器，其信号传导更接近天然TCR复合体，并能降低T细胞治疗过程中产生的细胞因子风暴，同时，该T细胞抗原耦合器(T cell antigen coupler，TAC)构建的T细胞可发挥更强的抗肿瘤效果，从而展现出良好的应用前景。此外，该靶向CD19的T细胞抗原耦合器还能够分泌抗PD-1的单链抗体，从而封闭PD-1：PD-L1/PD-L2之间的免疫抑制信号，减少T细胞抑制信号。

附图说明