[发明专利]一种靶向GPC3的嵌合抗原受体及其应用

说明书

本发明公开了一种靶向GPC3的嵌合抗原受体及其应用，属于肿瘤免疫治疗领域。所述嵌合抗原受体包括：依次连接的信号肽、靶向GPC3的单链抗体、Myc标签、CD8α铰链区、CD28跨膜区、共刺激因子、胞内信号域、P2A连接肽和CCL19分泌区。该嵌合抗原受体能够识别GPC3抗原，采用该新型嵌合抗原受体构建的CAR‑T细胞对GPC3靶蛋白具有良好的杀伤能力，同时该靶向GPC3的嵌合抗原受体还能分泌趋化因子CCL19，在不改变抗肿瘤活性的同时，产生的趋化因子有望促进免疫细胞向肿瘤微环境浸润，抑制肿瘤的生长速度，缩小肿瘤的体积，使得该靶向GPC3的嵌合抗原受体具有更强的抗实体瘤肿瘤活性，从而展现出良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及肿瘤免疫治疗领域，特别涉及一种靶向GPC3的嵌合抗原受体及其应用。

背景技术

嵌合抗原受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell，CAR-T)是将融合有CAR基因以核酸的形式导入到宿主T淋巴细胞基因组中构建而成。CAR-T在血液瘤中的应用中表现出令人可喜的治疗效果，特别对复发、难治的B淋巴细胞白血病病人，缓解率达到90％以上。但在实体瘤的应用方面，由于缺乏肿瘤特异性抗原等原因，使得CAR-T在治疗实体瘤方面在临床上尚未取得较好的疗效。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种靶向GPC3的嵌合抗原受体及其应用。所述技术方案如下：

一方面，本发明实施例提供了一种靶向GPC3的嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括：依次连接的信号肽、靶向GPC3的单链抗体、Myc标签、CD8α铰链区、CD28跨膜区、共刺激因子、胞内信号域、P2A连接肽和CCL19分泌区，所述信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ IDNO：1所示，所述靶向GPC3的单链抗体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示，所述Myc标签的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示，所述CD8α铰链区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：4所示，所述CD28跨膜区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：5所示，所述胞内信号域的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：6所示，所述P2A连接肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：7所示，所述CCL19分泌区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：8所示。

进一步地，所述靶向GPC3的嵌合抗原受体还包括共刺激因子，所述共刺激因子的一端与所述CD28跨膜区的另一端连接，所述共刺激因子为CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、ICOS、NKG2D和B7-H3中的至少一种。

进一步地，所述共刺激因子为CD28，所述共刺激因子的核苷酸序列如序列表中SEQID NO：9所示。

另一方面，本发明实施例提供了一种上述靶向GPC3的嵌合抗原受体的应用，所述应用包括：将所述靶向GPC3的嵌合抗原受体作为抗肿瘤药物。

进一步地，所述肿瘤包括：肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌、卵黄囊瘤和神经母细胞瘤。

优选地，所述肿瘤为肝癌。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明实施例提供了一种靶向GPC3的嵌合抗原受体，GPC3抗原在原发性肝癌HCC中呈特异性高表达，且在肿瘤初期即可检出，尤其在小肝癌及甲胎蛋白AFP阴性的HCC患者中阳性率很高，在肝癌组织中GPC3水平明显升高，因此本发明实施例提供的嵌合抗原受体的以GPC3抗原作为靶点，并能够识别该GPC3抗原，这使得采用该新型嵌合抗原受体构建的CAR-T细胞对GPC3靶蛋白具有良好的杀伤能力，可发挥更强的抗肿瘤效果，同时该靶向GPC3的嵌合抗原受体还能分泌细胞趋化因子CCL19，在不改变抗肿瘤活性的同时，产生的趋化因子有望促进免疫细胞向肿瘤微环境浸润，抑制肿瘤的生长速度，缩小肿瘤的体积，使得该靶向GPC3的嵌合抗原受体具有更强的抗实体瘤肿瘤活性，从而展现出良好的应用前景。

附图说明