[发明专利]一种草莓脱毒组培苗繁育方法

权利要求书

1.一种草莓脱毒组培苗繁育方法，其特征在于，所述草莓脱毒组培苗繁育方法包括以下步骤：

第一步，草莓苗移栽、病虫害防治、施肥等田间管理工作，在马铃薯中心网室移栽脱毒苗2000株，在渝北区草莓基地移栽脱毒苗19500株；

第二步，利用高山低温气候促进草莓花芽分化，加上精细化管理，增施有机肥、生物菌肥，换地防病，合理灌溉等措施，繁育优质壮苗，为冬草莓生产提供优质脱毒原种苗。

2.如权利要求1所述的草莓脱毒组培苗繁育方法，其特征在于，所述草莓脱毒组培苗繁育方法脱毒草莓苗病毒检测，对红颜、隋珠、京藏香三个品种进行采样，病毒检测；所述生物菌肥为枯草芽孢杆菌生物菌肥。

3.如权利要求1所述的草莓脱毒组培苗繁育方法，其特征在于，所述草莓脱毒组培苗繁育方法4月初将红颜、隋珠、王妃3个优良品种的脱毒原原种苗3000苗移栽到武隆区仙女山镇海拔1300米以上的高山地区进行扩繁。

4.如权利要求1所述的草莓脱毒组培苗繁育方法，其特征在于，所述草莓脱毒组培苗繁育方法还包括：

取优良草莓品种的新生匍匐茎顶端为外植体，经消毒后进行茎尖剥离，将茎尖放入诱导培养基中诱导出小芽，将小芽放入分化培养基中分化出苗丛，经病毒检测后不带病毒的小苗进行生根培养后移栽，同时开展脱毒原原种苗保存工作。

5.如权利要求4所述的草莓脱毒组培苗繁育方法，其特征在于，所述草莓脱毒组培苗繁育方法具体包括以下步骤：

(1)茎尖剥离及接种

取草莓新生匍匐茎顶端长2㎝的茎尖，清洗消毒后，用无菌刀片切取0.2㎜～0.5㎜大小的茎尖组织，接种在分化培养基MS+6-BA0.5mg/L上，在23℃±2℃、光照强度2400lx、每天光照14～16h的培养室中培养2个月；

(2)分化培养

待茎尖分化成带有叶原基的小芽后，将小芽转移到新鲜的分化培养基上继续培养；当小芽长出叶片后，将带有叶片的小芽转移到成苗培养基MS+6-BA0.3mg/L上，大约培养2个月后分化成成苗丛；从苗丛上剪取叶片进行病毒检测，淘汰感染病毒的苗丛，保留无病毒苗丛；

(3)生根和炼苗

从脱毒苗丛上剪取株高在2㎝以上的试管苗，将试管苗基部的小芽切除，然后接种在生根培养基1/2MS+IB0.04mg/L中，进行生根培养30～40d后，将培养容器置于100目纱网的练苗室中，炼苗1周；

炼苗后，用镊子从培养容器中取出生根的试管苗，洗去试管苗根部附着的培养基，然后移栽入盛有营养基质的穴盘中，浇透水；营养基质配置方法：将草炭、蛭石、细土、有机肥按体积5:2:2:1的比例混合，按1㎏/m³加入氮磷钾20～5～10复合肥，混匀，过筛，高温蒸汽消毒后备用；

在穴盘上方搭建小拱棚，用塑料薄膜覆盖，初期适当遮阳，后期逐渐通风和增加光照；温度控制在15℃～25℃，空气相对湿度控制在85～90％；喷施多粘类芽孢杆菌生物菌肥2～3次；移栽6周后撤除薄膜，移栽8周后试管苗发育成定植的脱毒原原种苗；对脱毒原原种苗进行1次病毒抽样检测，要求感染率不超过5％为合格；

(4)脱毒原原种苗保存

将脱毒原原种苗定植在盛有营养基质的栽种容器中；容器长1米、宽60㎝、高40㎝；每个容器定植1株脱毒原原种苗；在开花结果期，观察脱毒原原种苗的植物学性状和生物学性状是否发生变异，淘汰有变异的植株；每年春季对脱毒原原种苗进行1次病毒检测，淘汰感染病毒的植株。

6.如权利要求3所述的草莓脱毒组培苗繁育方法，其特征在于，所述脱毒试管苗高山越夏扩繁具体包括以下步骤：

将前期组培生产的原原种穴盘苗运到高山地区进行扩繁，生产脱毒原种苗，利用高山低温气候促进草莓花芽分化，加上精细化管理，增施有机肥、生物菌肥，换地防病，合理灌溉措施，繁育优质壮苗；

(1)育苗地选择

选择海拔1000米以上，地势平坦、土质疏松、有机质含量高、排灌方便、光照充足，无土壤线虫及草莓病源且3年内未种植过草莓的地块作为脱毒种苗的繁育苗圃；每2年更换一次育苗地；

(2)整地施肥

配合整地，每667㎡施入腐熟的有机肥1000㎏，深翻、平整土地，耕匀耙细后做畦，畦宽1m～1.2m；于畦中间位置培土做窝，窝距60㎝～80㎝，定植前每窝施入氮磷钾20-5-10复合肥5g；

(3)定植

选择健壮、无病虫害的脱毒原种苗或脱毒原原种苗作为母株，外观形态要求矮壮、茎粗，根系完整，新根多；在春季气温达到10℃以上时，单行定植于畦中间，株距60㎝～80㎝，每亩1000株；栽植时使根系朝四方自然伸展，栽植深度上不埋心，下不露根；

(4)田间管理

夏季注意预防高温干旱，提前修建蓄水池保证水源充足，采取桔梗覆盖、搭遮阳网措施保墒降温；进入旺盛生长期，追施1～2次氮磷钾20-5-10复合肥，每亩每次用量控制在5～8千克，切忌高氮；

摘除花序；定植后，及时摘除母株上的花蕾花序，并经常摘除老叶、病叶；

匍匐茎整理；匍匐茎要保持间距，匍匐茎大量发生时，将相互靠近的匍匐茎拉开使其分布均匀；同时用土把匍匐茎上发生的不定根茎节段压稳，使不定根及时扎入土中；

(5)病毒检测

委托病毒检测机构定期对繁殖的脱毒种苗进行病毒抽样检测，要求病毒感染率不超过20％为合格。