[发明专利]具有生物活性的紫花苜蓿根部多糖及其硒化改性多糖的制备

说明书

具有生物活性的紫花苜蓿根部多糖及其硒化改性多糖的制备，涉及一种天然药物改性多糖的制备，首先从干燥的紫花苜蓿根中得到水提浸膏，去蛋白，去色素后，经过阴离子交换柱层析分离，用去离子水和一系列梯度的NaCl溶液洗脱，收集得到2个新的紫花苜蓿根部多糖组分RAPS‑1和RAPS‑2，它们的分子量范围为10～16 KDa，主要是由鼠李糖，阿拉伯糖，木糖，半乳糖醛酸,甘露糖,半乳糖和葡萄糖组成。对其中量大的RAPS‑2进行硒化修饰后得到新的硒化多糖Se‑RAPS‑2，它的分子量范围为10～12 KDa。DAPS‑1和Se‑DAPS‑2有一定的抗HepG‑2肿瘤活性，并呈浓度依赖性，Se‑DAPS‑2的抗HepG‑2肿瘤活性高于DAPS‑1和DAPS‑2。以上研究内容为多糖及其硒化产物的活性分析及抗肿瘤等疾病的药品开发奠定了理论基础。

技术领域

本发明涉及一种天然药物改性多糖的制备，特别是涉及一种具有生物活性的紫花苜蓿根部多糖及其硒化改性多糖的制备。

背景技术

紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是一种多年生的豆科牧草作物，广泛栽培于世界各地的温带地区。紫花苜蓿对于牧民来说是一种很重要的工业作物。此外，紫花苜蓿还可以也作为一种蔬菜被食用，世界各地的人们将其制成了沙拉，玉米饼，炸肉饼，布丁，汤和砂锅菜。作为一种功能性食品，紫花苜蓿在中国古代的许多药用书籍中被记载，比如《药物纲要》，并被古人当做所有食物之父。紫花苜蓿被用作牧草和蔬菜时，由于其含有丰富的营养价值，因此发挥出了潜在的健康促进作用，包括抗氧化性，抗炎，抗癌，抗菌，免疫增强和提高记忆力作用。大量的对紫花苜蓿活性成分的研究分离出了许多化学成分。因为紫花苜蓿含有优质的营养成分和各种不同的生物活性。

紫花苜蓿多糖（alfalfa polysaccharide）是从紫花苜蓿植株中提取出来的植物多糖。到目前为止，在紫花苜蓿的体外实验中，其具有免疫增强活性，抗肿瘤，降血糖和抗氧化活性。此外，紫花苜蓿多糖还被发现具有促进家畜和家禽生长的作用。由于紫花苜蓿多糖具有特殊的生物学功能和丰富的来源，因此，紫花苜蓿多糖具有巨大的应用潜力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有生物活性的紫花苜蓿根部多糖及其硒化改性多糖的制备，本发明制备的多糖化和硒化多糖具有一定的抗HepG-2肿瘤活性。为多糖的结构修饰，多糖的活性分析以及抗肿瘤方面疾病有关的功能性保健品和药物的开发奠定了理论基础。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

具有生物活性的紫花苜蓿根部多糖及其硒化改性多糖的制备，其制备过程包括：

（1）取干燥的紫花苜蓿根，依次用石油醚，乙醇回流提取去除脂和小分子后，加入蒸馏水加热回流2～6次，过滤，合并滤液；去蛋白，去色素后得到紫花苜蓿粗多糖；将得到的粗多糖经过阴离子交换柱层析分离，依次用蒸馏水﹑0.1～0.5 mol/L的NaCl溶液进行洗脱，用凝胶纯化后得到2个新的紫花苜蓿根部多糖RAPS-1和RAPS-2；

（2）将上述步骤（1）种得到的产量较大的多糖RAPS-2用硝酸-亚硒酸钠(NA-SS)法进行硒化修饰得到1个新的硒多糖Se-RAPS-2。

所述的具有生物活性的紫花苜蓿根部多糖及其硒化改性多糖的制备，所述制得的2个新的紫花苜蓿根部多糖，其结构片段分别为：

RAPS-1：→2)-α- L -Rhap-(1→，α- D -GalAp-(1→，→4)-β- D -Manp-(1→，→5)-α-L -Arap-(1→，→3)-β- D -Xylp-(1→和→6)-β- D -Glcp-(1→；

RAPS-2：→3)-α- L -Rhap-(1→，→2)-α- L -Rhap-(1→，→6)-α- D -Galp-(1→，α-D -GalAp-(1→，α- D -Glcp-(1→，→3)-β- D -Manp-(1→和→3)-β- D -Xylp(1→。