[发明专利]木聚糖酶T-Xyn的突变体及其应用有效
申请号: | 201910973166.4 | 申请日: | 2019-10-14 |
公开(公告)号: | CN110592051B | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 范光森;李秀婷;吴秋华;滕超;杨然 | 申请(专利权)人: | 北京工商大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12P19/14;C12P19/04;C12P19/12;C12P19/00 |
代理公司: | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人: | 欧阳石文 |
地址: | 100048*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚糖 xyn 突变体 及其 应用 | ||
1.一种木聚糖酶的突变体降解玉米芯生产木寡糖XOS的方法,其中,所述木聚糖酶的突变体是在相应于以SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列所示木聚糖酶而言,其第122位和第166位的氨基酸均替换为Ser而得到的;
其特征在于,在进行反应前,对玉米芯进行高温蒸煮热水解预处理,具体的是将玉米芯和蒸馏水在加热器内加热至160-200℃,预处理时间为20-40分钟;上述预处理后通过过滤分离得到固体部分和液体部分,并对两部分分别称重和测量体积,从而计算固体残渣部分和液体体积之间的比例关系;进行酶解时,再按计算求得的所述比例将所述固体部分和液体部分进行混合作为酶解的底物,其中酶解反应是在pH4.5-7.0,反应温度在40-60℃,反应时振揺速度为120-180rpm的条件下进行;突变体的酶用量为4-15 U / mL。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应在pH5.5,反应温度在45-55℃,反应时振揺速度为140-160rpm的条件下进行;突变体的酶用量为5-6 U / mL。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述对玉米芯进行高温蒸煮热水解预处理,具体的是将玉米芯和蒸馏水在加热器内加热至170-190℃,预处理时间为25-35分钟。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述对玉米芯进行高温蒸煮热水解预处理,具体的是将玉米芯和蒸馏水在加热器内加热至175-185℃,预处理时间为30分钟。
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