[发明专利]一种锁阳多糖的酶法提取工艺有效
申请号: | 201910977267.9 | 申请日: | 2019-10-15 |
公开(公告)号: | CN112661868B | 公开(公告)日: | 2023-03-14 |
发明(设计)人: | 樊海燕;陈贵林;刘江英 | 申请(专利权)人: | 内蒙古大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人: | 韩慧颖 |
地址: | 010021 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 锁阳 多糖 提取 工艺 | ||
1.一种锁阳多糖的酶法提取工艺,其特征在于,所述步骤如下:
(1)将锁阳软化后切成厚度为3 mm的厚片,烘干得原料;
(2)酶解辅助提取:
a、称取步骤(1)中的原料,加入胃蛋白酶和盐酸水溶液,酶解,得酶解液;其中所述胃蛋白酶的加入量为1.5% m/m;所述盐酸水溶液的加入量为1:10 m/v,盐酸水溶液pH为1.5;所述酶解温度为40℃,酶解时间为10-12 h;
b、将步骤a中得到的酶解液升温至微沸,保持微沸回流提取2-3 h,过滤,得滤液;
c、将步骤b所得滤渣按步骤a和步骤b所述方法重复操作两次,其中每次加入盐酸水溶液的量均为1:20m/v;
d、合并步骤b和步骤c中的滤液,得酶解辅助提取液;
(3)脱蛋白:将步骤(2)所得的酶解辅助提取液用Sevage法脱蛋白2-4次,弃去下层有机相,合并上层得水溶液;所述Sevage试剂由体积比为4:1的氯仿和正丁醇组成,所述Sevage试剂与酶解辅助提取液的体积比为1:3-1:5;
(4)浓缩醇沉:将步骤(3)所得的水溶液减压浓缩得浓缩液,所述浓缩液质量为水溶液的30%-60%;向浓缩液加入4倍量的无水乙醇,静置2-4 h,在2-25℃,转速为5000 r/min条件下离心20 min,得到锁阳多糖湿粉;
(5)冻干:将步骤(4)中所得的锁阳多糖湿粉冷冻干燥,即得所述的锁阳多糖。
2.如权利要求1所述的锁阳多糖的酶法提取工艺,其特征在于,所述步骤(2)的步骤a中胃蛋白酶的加入量为1.5% m/m,盐酸水溶液pH为1.5,酶解温度为40℃,酶解时间为12 h,步骤b中的微沸回流提取时间为3 h。
3.如权利要求1所述的锁阳多糖的酶法提取工艺,其特征在于,所述步骤(2)的步骤a中胃蛋白酶的加入量为1.5% m/m,盐酸水溶液pH为1.5,酶解温度为40℃,酶解时间为10 h,步骤b中的微沸回流提取时间为3 h。
4.如权利要求1所述的锁阳多糖的酶法提取工艺,其特征在于,所述步骤(2)的步骤a中胃蛋白酶的加入量为1.5% m/m,盐酸水溶液pH为1.5,酶解温度为40℃,酶解时间为10 h,步骤b中的微沸回流提取时间为2 h。
5.一种锁阳多糖的酶法提取工艺,其特征在于,所述步骤如下:
(1)将锁阳软化后切成厚度为3 mm的厚片,烘干得原料;
(2)酶解辅助提取:
a、称取步骤(1)中的原料,加入胃蛋白酶和盐酸水溶液,酶解,得酶解液;其中所述胃蛋白酶的加入量为1.5%m/m;所述盐酸水溶液的加入量为1:10m/v,盐酸水溶液pH为1.5,所述酶解温度为40℃,酶解时间为10h;
b、将步骤a中得到的酶解液升温至微沸,保持微沸回流提取3 h,过滤,得滤液;
c、将步骤b所得滤渣按步骤a和步骤b所述方法重复操作两次,其中每次加入盐酸水溶液的量为1:40m/v和1:10 m/v;
d、合并步骤b和步骤c中的滤液,得酶解辅助提取液;
(3)脱蛋白:将步骤(2)所得的酶解辅助提取液用Sevage法脱蛋白2-4次,弃去下层有机相,合并上层得水溶液;所述Sevage试剂由体积比为4:1的氯仿和正丁醇组成,所述Sevage试剂与酶解辅助提取液的体积比为1:3-1:5;
(4)浓缩醇沉:将步骤(3)所得的水溶液减压浓缩得浓缩液,所述浓缩液质量为水溶液的30%-60%;向浓缩液加入4倍量的无水乙醇,静置2-4 h,在2-25℃,转速为5000 r/min条件下离心20 min,得到锁阳多糖湿粉;
(5)冻干:将步骤(4)中所得的锁阳多糖湿粉冷冻干燥,即得所述的锁阳多糖。
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