[发明专利]IgM-FC片段、IgM-FC抗体及制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种IgM‑FC片段、IgM‑FC抗体及制备方法和应用，涉及生物化学技术领域，本发明提供了IgM‑FC片段作为免疫原在制备能够与IgM特异性结合的抗体中的应用，以IgM‑FC片段为免疫原免疫动物产生的抗体能够与IgM特异性结合。

技术领域

本发明涉及生物化学技术领域，尤其是涉及一种IgM-FC片段、IgM-FC抗体及制备方法和应用。

背景技术

免疫球蛋白M(IgM)是人的免疫球蛋白之一，根据结构不同将免疫球蛋白分为五种，分别为IgA、IgG、IgD、IgE和IgM。IgM占血清免疫球蛋白总量的5％～10％，血清浓度约1mg/ml，是免疫球蛋白中分子量最大的Ig，一般不能通过血管壁，主要存在于血液中。它是免疫应答中首先分泌的抗体，是机体抗感染的先头部队，一经感染快速产生，经过一段时间，IgM抗体量逐渐减少而消失。母体中的IgM不能通过胎盘，如果胎儿或新生儿的血液中发现有IgM，说明已发生过宫内感染。血清中检出IgM，提示近期发生感染，可用于感染的早期诊断。

目前国内对于感染性疾病的早期诊断一般使用抗人IgM的单抗或者是多抗，当然单抗比多抗更具特异性，减少了假阳性的发生。μ链作为IgM特有的重链，抗μ链的抗体更具有特异性，μ链分为恒定区和可变区，恒定区序列相对保守并具有抗原结合位点，以恒定区作为抗原免疫动物产生的抗体可以与大多数的IgM特异性结合，因此选择恒定区的肽段序列作为全分子IgM的替代物，可得到特异性与IgM结合的抗IgMμ链的抗体。

尽管抗IgMμ链的单克隆抗体组为酶标二抗已广泛的用于感染性疾病的早期诊断及免疫学的研究等方面，但制备抗IgMμ链的单克隆抗体的过程繁琐、成本较高。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供IgM-FC片段作为免疫原在制备能够与IgM特异性结合的抗体中的应用，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的第二个目的在于提供一种IgM-FC片段的制备方法，该方法工艺简单，所用的纯化工艺及酶切工艺均便于操作，普适性广，且无需依赖昂贵的实验仪器，成本较低，适合大规模的推广应用。

本发明的第三个目的在于提供应用上述制备方法制备得到的IgM-FC片段，该片段为IgM特异性片段，与全长IgM比跟其他免疫球蛋白类抗体只有弱交叉反应。

本发明的第四个目的在于提供一种IgM-FC抗体的制备方法，该方法工艺简单，操作方便，适合大规模推广应用。

本发明的第五个目的在于提供一种IgM-FC抗体，该抗体可以与IgM特异性结合。

本发明的第六个目的在于提供上述的IgM-FC抗体在胶乳增强平台作为阻断剂中的应用。

本发明提供了IgM-FC片段作为免疫原在制备能够与IgM特异性结合的抗体中的应用；

优选的IgM-FC片段是五聚体的蛋白。

本发明还提供了一种IgM-FC片段的制备方法，所述制备方法包括：

将预处理后的阴性血清依次经粗分离处理及蛋白除杂处理后，得到IgM，酶切所述IgM，得到IgM-FC片段。

进一步地，所述预处理包括去除阴性血清中的脂蛋白。

进一步地，所述粗分离处理包括沉淀法处理；

优选地，所述沉淀法包括硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法、丙酮沉淀法、苦味酸沉淀法、磷钨酸盐沉淀法或三氯乙酸沉淀法。

进一步地，蛋白除杂处理包括层析处理；

优选地，所述层析处理包括亲和层析处理和离子交换层析处理；