[发明专利]利用HCH285菌株固态发酵生产bostrycin的方法

说明书

本发明提供了一种利用HCH285菌株固态发酵生产bostrycin的方法，该方法将蕲艾内生真菌HCH285的二级种子液接种于固态发酵基质中培养，所述固态发酵基质为大米或土豆泥。该方法提高了发酵产物中bostrycin的含量，具有生产周期短、产量高、操作方便的特点。

技术领域

本发明涉及发酵技术领域，特别涉及一种利用HCH285菌株固态发酵生产bostrycin的方法。

背景技术

恶性肿瘤，俗称癌症。第三次全国居民死因调查结果显示，恶性肿瘤疾病引起的死亡率在我国城市居民所有死亡原因中居第二位，占总死亡率的22.32％，且发病率和死亡率都呈现持续上升趋势。近20年来，我国城市居民恶性肿瘤死亡构成由原来的21.88％增长到26.33％。恶性肿瘤已经成为严重威胁人类生命和健康的重大疾病，且呈持续的增长趋势。虽然抗肿瘤药物的数量多，但临床上大部分抗肿瘤药物存在细胞毒性强、选择性差、价格昂贵等问题。因此，寻找疗效确切、毒副作用小、作用于新靶点的抗肿瘤药物不仅具有重大的科学意义，也具有实际的社会效益。

天然产物具有结构骨架多样性等特点，是现代抗肿瘤药物先导结构的重要来源之一。以往的天然抗肿瘤药物大多是从陆生植物和海洋动植物体中提取分离得到的。从植物和动物原料中提取天然抗肿瘤药物，受到季节、气候、地理位置等诸多条件的制约，且提取率低、成本较高、工艺复杂，发展潜力有限。而微生物资源丰富，培养成本低廉。利用微生物发酵生产药物具有生产周期短、产量高等优点，已经成为获得天然抗肿瘤药物的一种有效手段。

抗癌活性成分bostrycin是一种天然四氢蒽酮化合物，红色，较早由T.Noda课题组从bostryconema alpestre中分离出来，随后又相继有从Nigrospora oryzaet、Arthrinwmphaeospermumt和Alternaria eichhorIli等分离出bostrycin的报道，均报道其具多种抗肿瘤活性。中山大学附属第一医院郭禹标等人进行了初步体外实验，发现bostrycin能够抑制多种癌细胞增殖和促进其凋亡，包括鼻咽癌、前列腺癌、结肠癌和乳腺癌。同时发现并证实bostrycin对人肺腺癌细胞株A549增殖有明显的抑制作用。中山大学生物科学技术学院陈冬妮等人研究发现，bostrycin的抗乳腺癌效果显著，其通过下调K/A信号途径诱导乳腺癌细胞凋亡。陈伟生通过体外试验，观察bostrycin对肺癌细胞株A549细胞增殖和凋亡的影响，并探讨了可能的作用机制。据文献报道，bostrycin能够抑制肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞的生长(Chen et al 2011，Chen et al 2012，陈冬妮2013)。国内外已有从植物中分离得到产bostrycin内生菌的报道，但这些报道主要集中在菌种的选育(筛选分离得到产bostrycin的内生菌)和液体摇瓶发酵(将筛选得到的内生菌液体发酵培养产bostrycin)。

本发明人所在的课题组之前筛选到了一株产bostrycin的蕲艾内生菌HCH285，专利号为“201710183008.X”，所述的菌株已于2017年2月23日送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：球黑孢菌(Nigrospora sphaerica)HCH285，保藏编号为CCTCC NO：M2017061，地址：中国武汉武汉大学。如何开发一种利用HCH285菌株固态发酵生产bostrycin的方法，使得最后发酵产物中bostrycin的得率高，成为亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了一种利用HCH285菌株固态发酵生产bostrycin的方法，发酵产物中bostrycin的得率高，具有生产周期短、产量高等特点。

本发明这样实现：

本发明提供一种利用HCH285菌株固态发酵生产bostrycin的方法，将蕲艾内生真菌HCH285的二级种子液接种于固态发酵培养基中培养，所述固态发酵培养基的基质为大米或土豆泥。