[发明专利]miR-2052在制备抗肝癌药物中的应用

说明书

本发明提供了一种miR‑2052的新用途‑在制备抗肝癌药物中的应用，所述miR‑2052的序列如SEQ ID NO.1所示；本发明还提供了一种抗肝癌药物，所述抗肝癌药物包括miR‑2052 mimic、miR‑2052真核表达载体、miR‑2052病毒表达载体、以及所述miR‑2052病毒表达载体包装形成的病毒中的至少一种。本发明通过大量的实验数据证明miR‑2052能够明显抑制肝癌细胞的增殖、侵袭与转移，因此miR‑2052可用于制备防治肝癌的药物。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及miR-2052在制备抗肝癌药物中的应用。

背景技术

肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一。其发病机制是极其复杂的，可以有多种原因，包括慢性乙型肝炎病毒或丙型肝炎病毒感染、接触黄曲霉毒素B1、酒精性和非酒精性脂肪性疾病等。尽管最近的研究发现了许多影响肝癌发展的基因和途径，但治疗和患者预后仍不能令人满意。

微小RNA(miRNA)广泛存在于生物体内，具有高度保守性，并参与了机体内的多种病理生理过程。miRNA是由19～25个核苷酸构成的内源性非编码RNA，参与信使RNA稳定性和翻译的控制。它最初是在1993年由Ambros等发现的。MiRNA基因是一种非编码基因，其转录产物是miRNA。miRNAs的异常调节参与多种疾病的发生和发展，包括多种癌症、心血管疾病及退行性疾病等。它在体内胚胎发生、调节细胞分化、增殖和凋亡等正常生理变化中发挥关键作用。因此寻找新的与肝癌发生相关的miRNA，对于肝癌的诊断和治疗将非常有意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供miR-2052的新用途-在制备抗肝癌药物中的应用。

本发明是这样实现的：

第一，本发明检测了42对肝癌组织和癌旁组织中miR-2052的表达水平，结果如图1所示，miR-2052的表达水平在肝癌组织比癌旁组织中明显降低。

第二，本发明采用CCK8实验检测miR-2052对人肝癌细胞增殖的影响，图2A-B可知，转染了miR-2052模拟物(miR-2052mimic)的人肝癌细胞HLF和97H的增殖速率显著低于转染了NC-mimic的人肝癌细胞；由图2C-D可知，转染了miR-2052抑制物(miR-2052inhibitor)的人肝癌细胞HLF和97H的增殖速率显著低于转染了NC-inhibitor的人肝癌细胞，同样表明miR-2052可以抑制人肝癌细胞的增殖速率。综上所述，CCK8检测结果显示miR-2052抑制了HCC细胞的增殖。

第三、本发明采用trans-well实验检测miR-2052对HCC细胞的侵袭与转移能力的影响，结果trans-well分析显示miR-2052模拟物(miR-2052mimic)降低了人肝癌细胞HLF和97H细胞的侵袭(图3A)与转移(图3B)，而miR-2052抑制剂(inhibitor)增加了HLF和97H细胞的侵袭(图3C)与转移(图3D)。

第四，本发明采用异种移植瘤模型研究miR-2052在裸鼠体内的作用，结果表明，miR-2052可以在裸鼠体内抑制肝癌细胞的增殖。

综上可知，miR-2052可抑制肝癌细胞的增殖、侵袭与转移。

因此，所述miR-2052可以作为抗肝癌药物进行应用。具体应用时，可以将miR-2052mimic或miR-2052病毒表达载体包装形成的病毒制备成抗肝癌药物制成不同的剂型，也可以构建miR-2052的表达载体(表达区序列如SEQ ID NO.4所示，包括真核表达载体，病毒表达载体)用于基因治疗。

所述抗肝癌药物的剂型为颗粒剂、缓释剂、显微注射剂、转染剂或表面活性剂；所述抗肝癌药物还包括制备不同剂型所需的常规辅料。

本发明具有的有益效果是：