[发明专利]一种动物精子稀释液

说明书

本发明涉及一种动物精子稀释液，该稀释液由50mL‑100mL丙三醇、10g‑20g葡萄糖、10g‑20g果糖、20g‑30g三羟甲基氨基甲烷、10g‑20g柠檬酸、0.1g‑0.5g脱脂小麦蛋白粉、0.1g‑1g脱脂豌豆蛋白粉、0.5g‑1g脱脂花生蛋白粉、0.5g‑1g脱脂大豆蛋白粉和180mL‑190mL灭菌蒸馏水组成。本发明的动物精子稀释液用于动物精子的保存。本发明解决了传统方法的动物精子稀释液的观察视野不清晰、易污染、存活时间短和不规范使用抗生素以致超级细菌产生的问题。

本发明是分案申请，原中国专利申请号为：201610494390.1，申请日为：2016年6月29日，原申请的专利名称为：动物精子稀释液及其制备方法和利用该稀释液冷冻、冷藏保存精子的方法。

技术领域

本发明属于动物技术领域，尤其涉及一种动物精子稀释液。

背景技术

现有技术通常利用动物源稀释液来存储动物精子，而动物源稀释液如卵黄稀释液会引入其他动物源的病原微生物，给人工授精母畜群带来疾病，特别是在配制稀释液时加入大量的抗生素，不规范使用抗生素以致超级细菌产生。卵黄稀释液现用现配不易保存不用的蛋清或蛋壳在垃圾桶内不及时处理实验室容易有臭鸡蛋的味道，污染环境。卵黄稀释液在显微镜下观察精子活力，由于存在卵黄颗粒使视野不清晰，不易于观察。

也有研究者利用无动物源的物质制备动物精子稀释液，但是该稀释液利用的物质如咖啡因属于禁销药品，不适合大批量推广应用，而且有精子活力不持久、存活时间短的问题。

发明内容

鉴于现有技术所存在的问题，本发明提供一种动物精子稀释液、及其制备方法、冷藏或冷冻保存动物精子的方法。

本发明的目的是为了解决传统方法制备的动物精子稀释液的观察视野不清晰、易污染、存活时间短和不规范使用抗生素以致超级细菌产生的问题，而提供了动物精子稀释液及其配制方法和利用该稀释液冷冻、冷藏保存精子的方法。

本发明的动物精子稀释液由丙三醇、葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、脱脂小麦蛋白粉（蛋白质、小麦蛋白肽）、脱脂豌豆蛋白粉(蛋白质、K因子、胡萝卜素、维生素Bt、维生素E、维生素C)、脱脂花生蛋白粉(蛋白质、钙、磷、铁、硫胺素，棕榈酸、维生素A、B、C、E、K)、脱脂大豆蛋白粉（蛋白质、卵磷脂、植物免疫因子、植物微量元素）和灭菌蒸馏水组成。

本发明提供一种动物精子稀释液，由50mL-100mL丙三醇、10g-20g葡萄糖、10g-20g果糖、20g-30g三羟甲基氨基甲烷、10g-20g柠檬酸、0.1g-0.5g脱脂小麦蛋白粉、0.1g-1g脱脂豌豆蛋白粉、0.5g-1g脱脂花生蛋白粉、0.5g-1g脱脂大豆蛋白粉和180mL-190mL灭菌蒸馏水组成。

本发明的有益效果：本发明通过合理的设置各组分以及各组分的配比，具有精子活力持久、存活时间长等优点。本发明解决了传统方法的动物精子稀释液的观察视野不清晰、易污染、存活时间短和不规范使用抗生素以致超级细菌产生的问题。

上述的动物精子稀释液可以按以下步骤制备：

（1）用分析天平称20g-30g三羟甲基氨基甲烷，然后取180mL-190mL灭菌蒸馏水，在容量瓶中混合溶解，得混合物；

（2）分别称取：分别称取0.5g-1g脱脂大豆蛋白粉、0.1g-1g脱脂豌豆蛋白粉、0.5g-1g脱脂花生蛋白粉和0.1g-0.5g脱脂小麦蛋白粉溶于步骤（1）的混合物中，超声波裂解大分子蛋白、细菌和病毒，获得低分子蛋白或多肽混合的无菌溶液；放入4℃冷藏沉降24h-48h；

（3）弃去步骤（2）中的沉淀物，得上清液；在分析天平上分别称取10g-20g柠檬酸、10g-20g葡萄糖、10g-20g果糖和50mL-100mL丙三醇加入上述上清液中，超声波混匀裂解细菌和病毒，放入4℃冷藏得到动物精子稀释液。