[发明专利]一种防治植物线虫病害的巨大芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.防治植物线虫病害的巨大芽孢杆菌，其特征在于：巨大芽孢杆菌(Bacillusmegatherium)BCCX15，其保藏编号是：CGMCC NO.18007；其为菌体杆状，其长度为3.49um～6.49um、宽度为1.10um～1.50um，呈链状排布；产芽孢、芽孢中生，短柱状，革兰氏染色反应阳性；所述巨大芽孢杆菌能利用蔗糖，不能利用乳糖，柠檬酸盐试验、淀粉水解试验、明胶水解、酪氨酸水解、接触酶试验反应都为阳性；吲哚试验、甲基红试验和伏普试验反应都为阴性。

2.一种如权利要求1所述的巨大芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，所述培养方法为：利用牛肉膏蛋白胨液体培养基对巨大芽孢杆菌进行接种并培养，其中，培养条件为：培养基的初始pH值为5.5～9.5，巨大芽孢杆菌的接种量1％～9％，培养温度为23.5℃～41.5℃，培养基的装瓶量为10％～50％。

3.根据权利要求2所述的巨大芽孢杆菌的培养方法，其特征在于，采用加富牛肉膏蛋白胨液体培养基，BCCX15的最优发酵条件为pH7.5、接种量3％、10％的装瓶量、24h的培养时间，活菌数达到2.3×10¹⁰CFU/mL。

4.一种如权利要求1所述的巨大芽孢杆菌的菌剂，其特征在于，所述菌剂采用巨大芽孢杆菌BCCX15发酵培养制备得到，菌剂为液体或者固体。

5.一种如权利要求4所述的巨大芽孢杆菌菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)发酵罐发酵培养基用加富牛肉膏蛋白胨液体培养基，装料系数为50-80％；

(2)按1％～9％的接种量接入培养16～18h的巨大芽孢杆菌种子液，200～300r/min，23.5℃～41.5℃条件下发酵，加入消泡剂控制消泡；

(3)发酵过程中通气量(V/V·min)1:1～2，控制pH为5.5～9.5，发酵24～72h，得到发酵液；发酵60h活菌数为4.4×10¹⁰CFU/mL～7.8×10¹⁰CFU/mL，芽孢率为85.1％～91.2％；

(4)用无菌水将上述发酵液调整到1×10⁹CFU/mL，即得巨大芽孢杆菌的液体菌剂；将所述液体菌剂按1:1(V:W)加入灭菌的麸皮吸附，35℃～40℃通风干燥后即得巨大芽孢杆菌固体菌剂。

6.如权利要求4所述的巨大芽孢杆菌菌剂在防治植物线虫病害中的应用。

7.根据权利要求6所述的巨大芽孢杆菌菌剂在防治植物线虫病害中的应用，其特征在于，所述植物线虫病害是小麦胞囊线虫病、花生根结线虫病、网纹瓜根结线虫病、番茄根结线虫病、黄瓜根结线虫病。

8.根据权利要求7所述的巨大芽孢杆菌菌剂在防治植物线虫病害中的应用，其特征在于，用于防治网纹瓜根结线虫病、番茄根结线虫病、黄瓜根结线虫病时，于移栽前穴施巨大芽孢杆菌的液体菌剂，施用剂量为60-70mL/穴。

9.根据权利要求7所述的巨大芽孢杆菌菌剂在防治植物线虫病害中的应用，其特征在于，用于防治小麦胞囊线虫病、花生根结线虫病时，混土施用巨大芽孢杆菌的固体菌剂，施用剂量为5kg/667m²～7kg/667m²。