[发明专利]检测肺癌标志物的光电化学基因传感器及其制备方法和应用

说明书

本发明提供检测肺癌标志物的光电化学基因传感器及其制备方法和应用，属生物技术领域。该传感器是在ITO电极表面修饰PDA‑Pb²⁺/Cy3‑CP₁和PDA‑Cd²⁺/Cy5‑CP₂探针复合物后得到的；探针复合物分别是由Cy3‑CP₁与负载有铅离子的聚多巴胺纳米材料、Cy5‑CP₂与负载有镉离子的聚多巴胺纳米材料结合后形成的。该传感器制备方法包括：负载有铅离子的聚多巴胺纳米材料与捕获探针Cy3‑CP₁结合、负载有镉离子的聚多巴胺纳米材料与捕获探针Cy5‑CP₂结合形成探针复合物；将各探针复合物依次滴于还原氧化石墨烯电极表面。本发明传感器能够同时准确、灵敏地检测肺癌标志物，制备方法简单，易于操作。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及检测肺癌标志物的光电化学基因传感器及其制备方法和应用。

背景技术

HOTAIR(ENSG00000228630.1，NONCODE Database)是肺癌组织中一种系统失调的长链非编码RNA(lncRNA)。然而，无论是单一的特异性序列作为生物标志物，还是利用昂贵的仪器，都可能导致假阳性结果，或难以推广。因此，建立一种更可靠、更廉价的检测多种lncRNA特异性序列的方法是非常有必要的。光与电化学传感器具有简单高效、低成本、准确性高的特点，常被应用于核酸检测体系的构建。光与电化学相结合的双通道检测双组分特征序列体系更是降低了成本，提高了检测准确性。

发明内容

本发明的目的是提供一种检测肺癌标志物的光电化学基因传感器，能够同时准确、灵敏地检测肺癌标志物。

本发明还提供光电化学基因传感器的制备方法，该方法简单，易于操作。

本发明的目的采用如下技术方案实现。

检测肺癌标志物的光电化学基因传感器，是在ITO电极表面修饰了PDA-Pb²⁺/Cy3-CP₁探针复合物和PDA-Cd²⁺/Cy5-CP₂探针复合物后得到的；所述PDA-Pb²⁺/Cy3-CP₁探针复合物是Cy3-CP₁与负载有铅离子的聚多巴胺纳米材料结合后形成的；PDA-Cd²⁺/Cy5-CP₂探针复合物是Cy5-CP₂与负载有镉离子的聚多巴胺纳米材料结合后形成的；

Cy3-CP₁的序列如下：5’-COOH-CCCGTTCTGCCCGTGAGTGTCTGTCTCCAA-Cy3-3’，

Cy5-CP₂的序列如下：：5’-COOH-TTTTCTAAGGTCAGTGGTTTTTGTTTTTGT-Cy5-3’。

在本发明中，所述负载有铅离子的聚多巴胺纳米材料是将聚多巴胺纳米材料与硝酸铅混合、搅拌后得到的；负载有镉离子的聚多巴胺纳米材料是将聚多巴胺纳米材料与硝酸镉混合、搅拌后得到的。

在本发明中，所述聚多巴胺纳米材料是将多巴胺盐酸盐分散于水后，加入NaOH水溶液，在45-55℃条件下搅拌后得到的。

本发明还提供检测肺癌标志物的光电化学基因传感器的制备方法，包括如下步骤：

(1)负载有铅离子的聚多巴胺纳米材料与捕获探针Cy3-CP₁结合形成探针复合物；负载有镉离子的聚多巴胺纳米材料与捕获探针Cy5-CP₂结合形成探针复合物；

(2)将各探针复合物依次滴于还原氧化石墨烯电极表面，得到所述光电化学基因传感器。