[发明专利]烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂制备及应用

权利要求书

1.烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂制备，其特征在于，枯草芽孢杆菌SL-19保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCCNo.18089；

制备方法包括以下步骤：

S1、斜面活化扩增培养：将枯草芽孢杆菌SL-19试管斜面接种于平板进行菌落活化和扩增、将扩增好的菌落平板接种于液体培养基中进行活化培养至对数生长期(60小时)，制得活化菌群液体；

S2、种子液发酵：将步骤一制得活化菌群液体在以种子罐体积9％接种于种子罐中的发酵培养液中发酵培养，溶氧量为18％，转速230rpm，种子罐的温度32℃，接种发酵菌液39小时后，每隔2小时对种子罐中的发酵液进行发酵质量检测，直到发酵液菌体生长比较饱满即将出现芽孢时，获得发酵菌种，种子罐中的发酵时间为48小时；

S3、发酵培养：将步骤二制得的发酵菌种的9％接种于发酵罐中的NBP培养液中发酵培养，溶氧量为18％，搅拌速度230rpm，发酵罐的温度32℃，接种发酵29小时后，每隔2小时对发酵罐进行发酵质量检测，观察菌含量，直到发酵罐中发酵液中的活孢子数达50亿/ml以上时，即可将发酵液出罐，进行分装，发酵罐中的发酵时间为48小时，制得枯草芽孢杆菌SL-19菌剂。

2.根据权利要求1所述的烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂制备，其特征在于，步骤一中的液体培养基组分如下，均为重量百分比：葡萄糖1.0％，酵母浸粉1.4％，蛋白胨1.2％，氯化钠1.0％，余量为水，pH7.3。

3.根据权利要求1所述的烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂制备，其特征在于，步骤一中的活化培养条件为：将斜面保存的菌种接种于液体培养基中，32℃，230转/分振荡培养96小时，即为活化菌体。

4.根据权利要求1所述的烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂制备，其特征在于，步骤二中液体发酵培养基组分如下，均为重量百分比：玉米粉2.1％，蛋白胨2.5％，豆饼粉2.0％，淀粉1.0％，酵母浸膏1.0％，NaCl 3.0％，MgSO4·7H₂O 0.12％，余量为水，PH7.1。

5.根据权利要求1所述的烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂制备，其特征在于，步骤三中NBP培养液的组成成分及重量百分比为：牛肉膏3.5％，蛋白胨4.0％，酵母浸膏2.5％，葡萄糖3.5％，NaCl 2.0％，余量为水，pH7.2。

6.一种根据权利要求1所述制备方法制备烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂的应用，其特征在于，制备的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂用于防治烟草赤星病。

7.一种根据权利要求1所述制备方法制备烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂的应用，其特征在于，将制备的菌剂与水按质量份1：400混合，用于移栽前将进行土壤喷雾处理，使用量为10g/㎡。

8.一种根据权利要求1所述制备方法制备烟草赤星病生物防治的枯草芽孢杆菌SL-19菌剂的应用，其特征在于，将制备的菌剂与水按质量份1：400混合，用于移栽后用稀释的菌剂进行叶面喷雾，喷雾量为100g/㎡。