[发明专利]一种海藻酸钠低聚糖聚合度检测方法有效
| 申请号： | 201910989633.2 | 申请日： | 2019-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN112683888B | 公开（公告）日： | 2022-06-03 |
| 发明（设计）人： | 尹恒;孙明 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78;G01N21/31 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 毛薇;李馨 |
| 地址： | 116000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海藻 酸钠低 聚糖 聚合 检测 方法 | ||
1.一种检测海藻酸钠低聚糖聚合度的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：
（1）制备DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂：将45.5g酒石酸钾钠溶于70℃水中，然后加入1.575gDNS和65.5ml的2mol/LNaOH溶液；再加入1.25g重蒸酚和1.25g亚硫酸钠，搅拌溶解，定容至250ml，得到所述DNS试剂；
（2）标准曲线的绘制：配置不同浓度的葡萄糖溶液，在540nm测其吸光度值，得到不同葡萄糖和吸光度曲线图，作为标准曲线图；
（3）配置不同浓度待测海藻酸钠低聚糖溶液，所述海藻酸钠低聚糖溶液的浓度在所述标准曲线线性范围内；
（4）取步骤（3）的海藻酸钠低聚糖溶液，加入所述DNS试剂，100oC水浴5-10min，在540nm测其吸光度值；根据标准曲线计算出还原糖的浓度，然后根据加入的待测海藻酸钠低聚糖的量计算还原糖的百分含量；
（5）通过还原糖百分含量与聚合度的关系曲线，得到待测海藻酸钠低聚糖的聚合度；
步骤（5）所述的还原糖百分含量与聚合度的关系曲线方程y=1.085x-0.136；所述方程为通过核磁测定的聚合度与还原糖含量进行拟合所得到的；x表示100/DP，DP表示聚合度，y表示所述的还原糖百分含量。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：所述海藻酸钠低聚糖为海藻低聚糖，所述海藻酸钠低聚糖的聚合度为2-30。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：所述海藻酸钠低聚糖由β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic acid, M）和α-L-古罗糖醛酸（α-L-guluronic acid, G）聚合而成；所述β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic acid, M）和α-L-古罗糖醛酸（α-L-guluronic acid,G）的结构式如下：
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4.根据权利要求3所述的测定方法，其特征在于，所述海藻酸钠低聚糖的结构式如下：
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