[发明专利]一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用

说明书

本发明提供了一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用，涉及植物组培快繁技术领域。本发明所述培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：蔗糖30g/L、琼脂7.5g/L、6‑BA 2.4～2.8mg/L、NAA 0.5～1.0mg/L和碳纳米管0.5～1.5mg/L。本发明所述培养基可以诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织，由愈伤组织诱导出丛生芽，建立起彩色马蹄的再生体系，约需要9～10个月的时间；经由愈伤组织诱导出的丛生芽数量多，芽生长速度快，可大幅度的提高其繁殖系数，同时加快了其繁殖的速度，极大的降低彩色马蹄莲组培苗的成本。

技术领域

本发明属于植物组培快繁技术领域，具体涉及一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用。

背景技术

彩色马蹄莲又名慈菇花、水芋、观音莲等，为天南星科(Araceae)马蹄莲属(Zantedeschia)多年生草本球根花卉，原产非洲。彩色马蹄莲花、叶雅致大方，有切花品种与盆栽品种等不同生长类型。并以其奇特的花形、艳丽的花色、高雅的花姿被喻为2l世纪的“彩色百合”。近年来，作为一种新兴的花卉，已在世界范围内迅速发展起来。在新西兰、荷兰、日本、美国、以色列等国家已建立起完善的生产繁殖技术体系。在我彩色马蹄莲的引种栽培也越来越多，许多盆花和切花的生产者已初见成效。做为“世纪的花卉之星”彩色马蹄莲有着巨大的发展潜力和喜人的发展前景。

但是目前尚未见到彩色马蹄莲再生体系建立的报道。而现有的彩色马蹄莲组培快繁的方式是几乎均以带芽块茎为外植体，诱导产生丛生芽，进而状芽、诱导生根，从而建立其快繁技术体系。此技术的缺点是繁殖系数低。由于快繁的过程中不产生愈伤组织，因此繁殖系数不高；没有愈伤组织，无法建立石蒜属的再生体系，更无法建立其遗传转化体系，无法实现对其进行分子生物学水平的遗传改良。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用，经由愈伤组织诱导出的丛生芽数量多，芽生长速度快，可大幅度的提高了其繁殖系数，同时加快了其繁殖的速度，极大的有利于降低彩色马蹄莲组培苗的成本。而且利用愈伤组织，有望建立彩色马蹄莲高效的遗传转化体系，从而可以对彩色马蹄莲进行多种遗传操作或生物工程研究，从分子生物学水平对其进行遗传改良，培育新的彩色马蹄莲品种。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基，所述培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：蔗糖30g/L、琼脂7.5g/L、6-BA2.4-2.8 mg/L、NAA0.5～1.0mg/L和碳纳米管0.5～1.5mg/L。

本发明还提供了所述培养基在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用。

本发明还提供了一种建立彩色马蹄莲再生体系的方法，包括以下步骤：

(1)以消毒后的已萌芽彩色马蹄莲块茎为外植体，将所述外植体接种于芽诱导培养基中进行芽诱导培养，得分化不定芽；所述芽诱导培养基以 MS培养基为基本培养基，还包括：蔗糖30g/L、琼脂7.5g/L、6-BA2.5～3.5 mg/L、NAA0.2～0.4mg/L和碳纳米管3.0～5.0mg/L；

(2)将所述分化不定芽接种至壮芽培养基上进行进行第一壮芽培养，得带块茎的幼苗；所述壮芽培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：蔗糖40g/L、琼脂7.5g/L、6-BA1.8～2.2mg/L、NAA0.2～0.3mg/L和碳纳米管 1.0～2.0mg/L；

(3)分离所述带块茎的幼苗上的块茎，将所述块茎接种于所述诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基上进行愈伤诱导培养，得愈伤组织；