[发明专利]调控花生侧枝角度、生长习性和株型的基因LBA5及其应用有效
| 申请号： | 201910994923.6 | 申请日： | 2019-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN110592102B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 张晓军;颜凡壮;于晓娜;张绍静;司彤;邹晓霞;王月福;王铭伦 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/82;C12N15/113;C12N15/11;A01H5/00;A01H6/54 |
| 代理公司： | 青岛高晓专利事务所(普通合伙) 37104 | 代理人： | 于正河 |
| 地址： | 266109 山东省青岛市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 调控 花生 侧枝 角度 生长习性 株型 基因 lba5 及其 应用 | ||
1.一种调控花生侧枝角度、生长习性和株型的基因LBA5在作物遗传改良中的应用，其特征在于：基因LBA5包含来自栽培花生两套亚基因的同源基因LBA5b和LBA5a，及它们相应的去功能的等位基因lba5b和lba5a，LBA5b核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，lba5b核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，LBA5a核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，lba5a核苷酸序列如SEQ IDNO:4所示。
2.一种调控花生侧枝角度、生长习性和株型的基因LBA5b和LBA5a编码的cDNA在作物遗传改良中的应用，其特征在于：基因LBA5b编码的cDNA有四种形式，分别如SEQ ID NO:5-8所示；基因LBA5a编码的cDNA有两种形式，分别如SEQ ID NO:9-10所示。
3.一种调控花生侧枝角度、生长习性和株型的基因LBA5b和LBA5a编码的蛋白质在作物遗传改良中的应用，其特征在于：基因LBA5b编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO：11-12所示；基因LBA5a编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO：13-14所示。
4.一种克隆花生基因LBA5b的引物，其特征在于：引物为LBA5b-F和LBA5b-R，其序列如SEQ ID NO：17-18所示，该引物能够在匍匐花生的cDNA中，通过PCR克隆扩增所述基因LBA5b的完整编码框。
5.一种用于构建花生基因LBA5b的过表达载体的引物，其特征在于：过表达载体为pHB-LBA5b，引物为LBA5b-OE-F和LBA5b-OE-R，其序列如SEQ ID NO：19-20所示。
6.利用权利要求5所述的引物构建过表达载体的方法，其特征在于：利用该引物在匍匐花生的cDNA中或含有该基因的质粒中扩增获得基因LBA5b，将扩增产物通过酶切后连接入过表达载体pHB，构建成为一种过表达转基因载体。
7.一种用于构建花生基因LBA5b基因编辑的目标靶点的序列，其特征在于：序列是sgRNA1和sgRNA2，其序列如SEQ ID NO：21-22所示。
8.利用权利要求7所述的靶点序列实现对花生基因LBA5b基因编辑的方法，其特征在于：将sgRNA1和sgRNA2连接进入CRISPR/Cas9载体的sgRNA区构建成对目标基因LBA5的基因编辑载体，将其转化进入花生实现对花生LBA5基因的编辑。
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