[发明专利]一种细胞膜损伤快速响应传感器及其制备方法和应用有效
申请号: | 201910997854.4 | 申请日: | 2019-10-21 |
公开(公告)号: | CN110849847B | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 田蒋为;余伯阳;张英 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;C12Q1/02 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 孙斌 |
地址: | 210009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞膜 损伤 快速 响应 传感器 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种细胞膜损伤快速响应传感器的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)聚多巴胺-聚乙烯亚胺PDA-PEI共聚物载体的制备:将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入到缓冲液中,在室温下避光搅拌;将搅拌后溶液过滤,然后透析以除去未反应的盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺得到聚多巴胺-聚乙烯亚胺PDA-PEI共聚物载体;
(2)传感器的构建:将聚多巴胺-聚乙烯亚胺PDA-PEI共聚物载体与PBS、超纯水、QD量子点MPA@CdSe/ZnS充分混合即得PDA-PEI-QD传感器,即为细胞膜损伤快速响应传感器;
所述盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺的质量比为1:1-1:10;所述聚乙烯亚胺的平均分子量为600Da-10kDa;所述传感器的构建中总反应体系为PBS与超纯水体积比1:1-1:10,QD量子点与PDA-PEI的终浓度比为1:4-2:4。
2.根据权利要求1所述的细胞膜损伤快速响应传感器的制备方法,其特征在于,所述制备方法为:
(1)将Tris-HCl缓冲液用超纯水稀释备用;
(2)分别取盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺,将二者加入到Tris-HCl缓冲液中,在室温下磁力搅拌器上避光搅拌2 -3h;
(3)将上述溶液用纤维素酯膜过滤,然后置于透析袋透析24 -36h以除去未反应的盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺得到聚多巴胺-聚乙烯亚胺PDA-PEI共聚物载体;
(4)将聚多巴胺-聚乙烯亚胺PDA-PEI共聚物载体与PBS、超纯水、QD量子点MPA@CdSe/ZnS充分混合即得PDA-PEI-QD传感器即为细胞膜损伤快速响应传感器。
3.一种权利要求1所述的细胞膜损伤快速响应传感器的制备方法所制备的细胞膜损伤快速响应传感器。
4.一种权利要求1所述的细胞膜损伤快速响应传感器的制备方法所制备的细胞膜损伤快速响应传感器在制备监测细胞膜结构和功能的完整性、评价细胞活力或药物毒性或药物活性的试剂中的应用。
5.一种权利要求1所述的细胞膜损伤快速响应传感器的制备方法所制备的细胞膜损伤快速响应传感器在制备评价药物防治细胞膜损伤、筛选防护细胞损伤的活性成分、分析中药疗效配伍改善细胞膜损伤或分析药物对细胞损伤的作用机制的试剂中的应用。
6.根据权利要求4或5所述的应用,其特征在于,所述应用方法为:将潜在毒性药物与细胞孵育一定时间后,毒性药物可诱导细胞膜表面化学物质改变,从而对细胞膜产生不同程度的损伤,加入所构建的传感器,根据传感器的荧光响应,快速检测毒性药物对细胞的毒性;将毒性药物与细胞孵育造模后,毒性药物对细胞膜产生不同程度的损伤,加入潜在的活性成分保护,根据传感器的荧光响应,快速筛选对细胞保护的活性成分。
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