[发明专利]一种产耐高温蛋白酶菌株

说明书

本发明属于微生物领域，具体涉及一种产耐高温蛋白酶菌株，所述菌株为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)，于2019年10月17日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌株保藏编号为：CCTCC M 2019836。本发明利用酪素培养基筛选法筛选出一株产蛋白酶B.cereus菌株HSU‑2，其产蛋白酶的最适反应pH值和温度分别是7.0和60℃，是一种耐高温的中性蛋白酶。该蛋白酶可耐受5.0％过氧化氢、5.0％十二烷基磺酸钠和5.0％去污剂Triton X‑100作用，而5.0％去污剂吐温80可显著提高该蛋白酶的酶活力。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体涉及一种产耐高温蛋白酶菌株。

背景技术

蛋白酶是能水解蛋白质的一种生物催化剂，该酶催化的反应具有速度快、条件温和、环保无污染而被广泛应用于制革、食品、医药卫生及化妆品等行业。蛋白酶在制革工艺中被用于原料皮残肉、胶原间隙蛋白和类粘蛋白的去除，使处理后的皮革柔软(胡学智，王俊，2008)；在食品工业上主要被用来嫩化肉类、水解蛋白质制备调味液、制作干酪等(胡学智，王俊，2008)。在医药卫生领域，中性蛋白酶被用于水解藏羊血清蛋白来制备抗氧化肽(高丹丹，等，2015)，也可被用于制备抗癌药物中间体(Teodora bavaro,Terreni,2016)等。此外，中性蛋白酶还可被用于化妆品研发中，用来除老化角质(张晓燕，国立东，刘晓艳，2018)。因此，研发新蛋白酶具有重要应用价值。

蛋白酶存在于动物组织、植物茎叶、果实及各种微生物中。受动植物资源的限制，目前工业上广泛用于生产的蛋白酶制剂主要来源于微生物；其中所用菌株主要为细菌、霉菌、少量酵母菌和放线菌。已有研究表明，细菌中产蛋白酶的菌株主要集中在枯草芽孢杆菌属(Bacillus subtilis)、短芽孢菌属(Brevibacillus)和盐单胞菌属(Halomonas)。蛋白酶按最适反应pH值可分为酸性(pH值2.0～6.0)、中性(pH值6.0～9.0)和碱性蛋白酶(pH值9.0以上)三大类，其中中性蛋白酶研究最早、研究较为清楚；然而，目前还鲜有文献报道中性蛋白酶能耐受60℃及以上高温。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种产耐高温蛋白酶菌株。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案为：

一种产耐高温蛋白酶菌株，所述菌株为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)，于2019年10月17日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌株保藏编号为：CCTCC M 2019836。

进一步的，所述菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供一种蛋白酶制备方法，将所述的菌株用种子活化培养基活化12h；再将活化后的菌种接种至发酵培养基中，置于28℃、180rpm摇床中恒温发酵5d；吸取发酵后培养液离心并吸取上清液。

本发明还提供一种蛋白酶，所述蛋白酶的使用条件为pH6.0～8.0，温度50～70℃。

本发明还提供一种发酵制品，包括所述产耐高温蛋白酶菌株的发酵液或发酵液的过滤液。

本发明还提供所述菌株在生产去污剂中的应用。

本发明还提供一种去污剂，包括所述的发酵制品和5.0％去污剂吐温80。

进一步的，所述去污剂中含有Ca²⁺。

本发明还提供一种产耐高温蛋白酶的菌剂，所述菌剂包含所述的菌株。

有益效果：