[发明专利]一种桑黄菌种稳定培养方法

权利要求书

1.一种桑黄菌种稳定培养方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

（1）将母种接种至斜面培养基中进行扩繁培养；

（2）将步骤（1）中扩繁培养得到的菌种接种至液体培养基中进行扩大培养；其中，液体培养基包括速效碳源和速效氮源；

（3）将步骤（2）中扩大培养的菌种接种至栽培种培养基中进行培养，培养过程中，采摘幼嫩子实体进行菌种分离，培养结束后，采摘成熟子实体；

其中，栽培培养基包括长效碳源、速效碳源、长效氮源、速效氮源和肉桂废弃物；所述速效碳源是由长效碳源发酵制得，所述速效氮源是由长效氮源发酵制得；

（4）根据步骤（1）、（2）和（3）进行扩繁培养、扩大培养以及进行栽培和进行菌种分离，如此循环；

需要改变的是：液体培养基中的速效碳源和速效氮源每次循环均分别增加5~10mL/L，磷酸氢钾、硫酸镁、维生素B1每次循环均分别增加0.1~0.2g/L。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是，所述长效碳源为农林副产品和/或其下脚料，农林副产品和/或其下脚料为稻草、麦草、玉米芯、棉籽壳、木屑中的一种或多种；长效氮源为麸皮、豆饼和畜禽粪便的混合物。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）中，培养条件为25~28℃恒温黑暗培养8~12天。

4. 如权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（2）中，速效碳源60~80mL/L，速效氮源15~30mL/L，磷酸氢钾0.5~1g/L，硫酸镁0.5~1g/L，维生素B1 0.5~1g/L，自然pH。

5.如权利要求4所述的方法，其特征是，所述速效碳源是通过以下方法制备得到的：

A、将农林副产品和/或其下脚料粉碎，加水混合均匀；

B、将纤维素降解菌接种至步骤A中的混合物中进行自然常温发酵，发酵时间为10~15天；

C、发酵结束后，固液分离，得到上清液，浓缩，即为速效碳源；

其中，农林副产品和/或其下脚料与水的添加比例为（5~10）kg：（3~5）L。

6.如权利要求4所述的方法，其特征是，所述速效氮源是通过以下方法制备得到的：

a、将麸皮、豆饼和畜禽粪便混合粉碎，加水混合均匀；

b、将酵母菌和乳酸菌接种至步骤a中的混合物中进行常温自然发酵，发酵时间为24~48h；

c、发酵结束后，固液分离，得到上清液，浓缩，即为速效氮源；

其中，麸皮、豆饼、畜禽粪便和水的添加比例为（1~2）kg：（2~4）kg：（2~4）kg：（3~8）L。

7. 如权利要求5所述的方法，其特征是，纤维素降解菌为复合菌，由里氏木霉、黑曲霉和枯草芽孢杆菌组成，其数量比例为（1~2）：（1~2）：（2~4）；纤维素降解菌的接种量为每100g培养基接种1.5mL菌液，1 mL菌液含有的菌种如下：里氏木霉、黑曲霉和枯草芽孢杆菌=（1~2）×10¹⁰cfu、（1~2）×10¹⁰cfu、（2~4）×10¹⁰cfu。

8.如权利要求6所述的方法，其特征是，酵母菌为酿酒酵母，乳酸菌为嗜热链球菌，其数量比例为（1~2）：（2~4）；酵母菌的接种量为每100g培养基接种（1~1.5）g菌粉，1g菌粉含有1.5×10¹¹cfu酵母菌活菌，乳酸菌的接种量为每100g培养基接种（1~1.5）g菌粉，1g菌粉含有3×10¹¹cfu乳酸菌活菌。

9.如权利要求5所述的方法，其特征是，纤维素降解菌发酵的温度为30~40℃。

10.如权利要求6所述的方法，其特征是，酵母菌和乳酸菌混合发酵的温度为35~42℃。