[发明专利]一种鉴定或辅助鉴定大豆是否含有雄性不育基因的方法及其应用有效
申请号: | 201911004258.8 | 申请日: | 2019-10-22 |
公开(公告)号: | CN112609016B | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 蒋炳军;孙石;韩天富;侯文胜;武婷婷;袁珊 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/04 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 王灏增 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 辅助 大豆 是否 含有 雄性不育 基因 方法 及其 应用 | ||
1.鉴定或辅助鉴定大豆是否含有大豆雄性核不育基因ms1的方法,其特征在于,检测待测大豆基因组在Chr13:22489400-24602997区间内是否存在一个39kb的删除,当存在,则所述待测大豆含有大豆雄性核不育基因或候选含有大豆雄性核不育基因;当不存在所述39kb的删除,则所述待测大豆为不含有大豆雄性核不育基因;所述检测待测大豆基因组在Chr13:22489400-24602997区间内是否存在一个39kb的删除通过下述方法确定:检测所述待测大豆中是否含有分子标记ms1-marker,当待检测大豆中含有分子标记ms1-marker的序列,则待测大豆基因组存在一个39kb的删除;当待检测大豆中不含有分子标记ms1-marker,则说明待检测大豆中不含有大豆雄性核不育基因ms1,其中,所述分子标记ms1-marker是如SEQ ID NO.1的DNA分子。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述检测所述待测大豆中是否含有分子标记ms1-marker包括如下步骤:针对所述分子标记ms1-marker设计特异性引物对,将所述特异性引物对命名为BUYU引物对;所述BUYU引物对由SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3中所示的两条单链DNA组成,以待测大豆的基因组为模板使用所述BUYU引物对进行扩增,当扩增产物含有342bp的阳性条带,表明待测大豆中含有分子标记ms1-marker,待测大豆含有大豆雄性核不育基因ms1;当扩增产物不含有342bp的阳性条带,表明待测大豆中不含有分子标记ms1-marker,待测大豆不含有大豆雄性核不育基因ms1。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
1)根据所述分子标记ms1-marker的序列,设计并合成分子探针;
2)使用所述分子探针检测待鉴定大豆中是否含有分子标记ms1-marker,当待检测大豆中含有分子标记ms1-marker的序列,则表明待检测大豆中含有大豆雄性核不育基因ms1,当待检测大豆中不含有分子标记ms1-marker的序列,则说明待检测大豆中不含有大豆雄性核不育基因ms1。
4.一种鉴定或辅助鉴定不育大豆的方法,其特征在于,所述方法包括以待鉴定大豆的基因组DNA为模板,分别使用KEYU引物对和权利要求2中所述BUYU引物对进行PCR扩增,通过电泳检测扩增产物,当待鉴定大豆的PCR扩增产物电泳带仅有342bp的阳性条带,没有219bp的阳性条带,则待鉴定大豆为纯合型不育大豆;所述KEYU引物对由SEQ ID NO.4和SEQ IDNO.5中所示的两条单链DNA序列组成。
5.权利要求1中所述的分子标记ms1-marker在大豆育种或在筛选含有大豆雄性核不育基因的大豆中的应用,当待检测大豆中含有分子标记ms1-marker的序列,则待测大豆基因组含有大豆雄性核不育基因ms1;当待检测大豆中不含有分子标记ms1-marker,则说明待检测大豆中不含有大豆雄性核不育基因ms1。
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