[发明专利]一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素B

权利要求书

1.一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤，(1)样品制备，采样后将样品粉碎；(2)样品提取与净化，采用QuEChERs技术对样品进行前处理，得到提取后的净化样品上清液；(3)高效液相色谱条件确认；(4)检测方法确认；(5)样品测定，对提取后的净化样品上清液进行定量测定。

2.根据权利要求1所述的一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，步骤(1)中样品采样量大于1kg，采样后样品使用高速粉碎机进行粉碎，过筛，全部通过10目筛。

3.根据权利要求1所述的一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，步骤(2)中采用QuEChERs技术对样品前处理过程步骤如下：

准确称取5.00g样品于含有净化剂包QuEChERs试管中，加入4mL一级水，10mL色谱纯甲醇，和QuEChERs提取剂，最后加入振子，放入QuEChERs处理仪器，样品处理条件为立体震荡10min，4000r/min高速离心10min，再立体震荡10min，4000r/min高速离心10min后，离心后取3ml上清液，过0.45nm尼龙微孔滤膜，得到净化后的样品上清液，备用。

4.根据权利要求1所述的一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，步骤(3)高效液相色谱条件确认的步骤如下：

流动相：甲醇：水溶液＝40:60，v/v；

等梯度洗脱条件：A，65％；B，35％；

色谱柱：C18柱，柱长150mm，内径4.6mm，填料粒径5μm；

流速：1.0mL/min；

柱温：40℃；

进样量：10μl；

光化学柱后衍生器；

激发波长：360nm；

发射波长：440nm。

5.根据权利要求1所述的一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，步骤(4)检测方法确认的步骤如下：

将黄曲霉毒素系列标准混合溶液2、5、10、20、50、100ng/ml依次测定，以标准物的峰面积为纵坐标，以质量浓度为横坐标，绘制标准曲线拟合线性方程，结果表明，各组分在线性范围内线性关系良好，线性相关系数均大于0.99；以空白样品加标实验测定的化合物信噪比3:1时为浓度最低检出限、信噪比为10:1时为浓度最低定量限；得到检测方法的确认。

6.根据权利要求3所述的一种利用QuEChERs技术快速检测坚果中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，所述QuEChERs试管中含有净化剂包配方为0.6g硫酸镁，0.1g PSA；所述QuEChERs提取剂配方为0.4g硫酸镁，0.1g氯化钠，0.1g柠檬酸钠，0.05g柠檬酸二钠。