[发明专利]一种用于胃癌早期筛查和诊断的血清蛋白标志物、试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开一种用于胃癌早期筛查和诊断的血清蛋白标志物，属于生物医学技术领域，血清蛋白标志物为TP53、GNAS、PBRM1、SRSF2、SMARCB1、GNA11、ACVR1B、PIK3CA或COPB1编码的蛋白中的任意一种或两种以上的联合。同时提供上述血清蛋白标志物的试剂盒及检测方法。本发明基于癌症驱动基因在肿瘤发生和发展中所起的作用，定制138个癌症驱动基因编码的人类蛋白质芯片，共包含180个人源重组蛋白质，先通过蛋白质芯片初步筛选出胃癌的早期检测血清标志物，再经过ELISA间接法实验进行验证，筛选出可用于胃癌早期筛查和诊断的一组胃癌联合检测血清标志物，其为TP53、SRSF2、SMARCB1和GNA11基因编码的蛋白的联合，其联合诊断胃癌ROC曲线下面积达0.950，95％CI为0.925‑0.976，保证特异度90.70％时，灵敏度为86.83％，一致率达到80.3％。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域。

背景技术

胃癌是一种常见的高致死性恶性肿瘤，其死亡率位居癌症中的第二，晚期胃癌的早期诊断率和5年生存率均20％。当前胃癌中广泛运用的检测手段包括无创检查(如B超、CT等)和有创检查(胃镜、钡餐等)，但缺乏依从性和普及运用的可能。因此，需要新的生物标记物及时发现胃癌，尤其是血清分子标志物，让胃癌患者能够及时有效的早查、早诊、早治，是提高胃癌患者生存率、降低死亡率的关键所在。尽管目前有一些肿瘤标志物，如CA125(癌抗原125)、CA19-9(癌抗原19-9)、CEA(癌胚抗原)、CA724(癌抗原724)等可用于胃癌的辅助检测，但其敏感性和特异性均不高，因此，到目前为止尚没有理想的可供临床使用的胃癌早期筛查和诊断的标志物。

近年来，在人类肿瘤学的研究领域内，许多研究已经发现癌症患者血清中含有一组独特的诱发自身抗体反应的细胞蛋白，被称为肿瘤相关抗原(tumor-associatedantigen，TAA)，其诱导产生的抗体称为抗TAA-抗体(autoantibody)。这一概念的提出对胃癌早期诊断研究指引了一个新的方向。肿瘤相关抗原(tumor-associate antigens，TAAs)的自身抗体在正常人和非肿瘤患者血清中不存在或滴度很低，而且患者血清中自身抗体水平的升高往往早于肿瘤症状的出现。再者，抗-TAA抗体具有其它肿瘤标志物不具备的优势，一方面是它能够在血清中持续稳定存在，而其它的标志物，包括TAA本身，在其被肿瘤细胞释放后就被快速降解或者在其进入血液循环后的很短时间内就被机体清除。而且，检测自身抗体的方法和试剂的普及性也有助于研究癌症患者体内抗-TAA抗体的产生规律和功能。因此，检测抗-TAAs的自身抗体可以作为早期肿瘤辅助筛查和诊断的血清标志物。与其他潜在标志物相比，抗TAAS自身抗体在癌症患者血清样品中具有高度稳定性和持久性，并且可以在疾病症状开始之前被检测到。近年来，抗TAAS自身抗体作为早期肿瘤生物标志物，在检测各种类型的肿瘤或作为肿瘤预后指标方面得到了广泛的探索。总的来说，由于肿瘤的异源性，单抗TAA自身抗体的敏感性和特异性较低，对特定肿瘤的诊断缺乏鉴别能力。