[发明专利]一种提高尼罗罗非鱼耐盐性能的嗜盐芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一种提高尼罗罗非鱼耐盐性能的嗜盐芽孢杆菌及其应用。在无菌条件下，将嗜盐性芽孢杆菌普通海水液体培养基进行活化；将活化后的菌液进行扩大培养，培养好的培养液即为接种液。用已灭菌的磷酸缓冲液清洗两次后，重悬，制成细胞悬液，均匀的喷洒在罗非鱼基础饲料上，使其浓度达到10⁸cfu/g饲料。本发明嗜盐性芽孢杆菌221添加至罗非鱼基础饲料中，能够显著提高生活在盐度16‰环境下的尼罗罗非鱼消化吸收能力，能提高其抗氧化能力以及抗菌能力，为罗非鱼的质量的提供奠定了有利的基础。同时也对完善罗非鱼配合饲料有着重要的意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种嗜盐性芽孢杆菌，具体涉及一种提高 尼罗罗非鱼耐盐性能的嗜盐芽孢杆菌及其应用。

背景技术

我国水产养殖业发展迅速，水产养殖总量多年来位居世界第一，在所有养 殖鱼类中，罗非鱼是世界重点养殖的淡水鱼类。尼罗罗非鱼为我国的经济鱼类， 是具有发展潜力的水产养殖优良品种。随着集约化养殖规模的扩大以及养殖环 境的改变，对其生长性能和病害防范提出了更高的要求。以往通常会采用提高 换水频率，大量只用抗生素起到高产防病的目的，但会对水产品质量造成相当 的影响，严重影响了尼罗罗非鱼的经济价值。

在集约化、规模化和环境变化的养殖条件下，动物因饲养密度，病毒感染， 惊吓等产生应激反应，出现各种不良的生理反应，影响营养物质的吸收，进而 影响生长性能降低，给养殖场的生产效益造成巨大损失。这其中既有管理不善 等因素，也有抗生素过度使用导致病原菌产生耐药性，亦有化学药物残留干扰 水生动物肠道菌群并持续破坏生态环境，影响水生动物的健康，导致水产品药 物含量过量，水产品质量下降，给食品安全问题带来巨大隐患。进入21世纪至 今，药物残留问题频频成为制约我国水产品向世界发展的瓶颈，给我国水产业 造成巨大的经济损失。为了改良水体环境，减少水产品中药物残留，有效促进水生动物的健康生长，人们开始把目光转移到益生菌。

自上世纪60年代外国学者提出益生菌概念，到现代对益生菌的准确定义： 在适量的情况下，通过改善体内微生物平衡给宿主带来健康益处的活的微生物， 由于动物源性的益生菌可以更好的定殖与适应动物的消化道内环境，更有利于 其发挥原生菌群所发挥的作用。通过不断地实验与实践，现代学者对益生菌有 了更加深入的了解。为了抑制病原微生物的生长以及对水生动物的侵害、促进 水生动物肠道对营养物质的消化吸收、加强水生动物的天然免疫力以及改良水 质不佳的水体，益生菌及将其应用于水生动物以期促进消化道所定殖的原生菌 群所发挥的这些作用，使现代高度集约化的水产养殖向着绿色、生态、环保的 方向可持续发展。

由于芽孢杆菌的内生孢子能抵抗恶劣的环境条件，储存方便不易失效，能 够制备形成稳定的微生物制剂产品，并且将其拌入饲料投喂养殖动物，可以耐 受消化道的酸性和碱性条件展示其他无法产生孢子的细菌所不具有的诸多优 势，受到了极大的关注。另外，芽孢杆菌易获得，易繁殖且生长快速，对营养 的需求不高，耐高热易于工业化生产，可分泌多种胞外酶和细菌素，无病原性 等优点，因此芽孢杆菌成为肠道益生菌良好的候选菌株。

发明内容

本发明的目的是提供了一种能够提高尼罗罗非鱼在咸水中生长性能、免疫 功能以及抗氧化功能并有效改善肠道健康的的嗜盐芽孢杆菌属菌株221。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种提高尼罗罗非鱼耐盐 性能的嗜盐芽孢杆菌，其中：该芽孢杆菌为嗜盐芽孢杆菌221，于2019年8月 26日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为CCTCC NO：M 2019669 保藏地址为：中国武汉大学。

优选地，该嗜盐芽孢杆菌221属于革兰氏阳性菌，菌落呈浅黄色、圆形微 凸起、表面光滑且边缘整齐。

优选地，该该嗜盐芽孢杆菌221每升培养基包括：酵母粉1～3g、牛肉膏2～ 5g、蛋白胨3～8g、氯化钠25～35g，pH值7～8。